Produção de proteínas recombinantes em células BHK-21 cultivadas em meio livre de soro fetal bovino.

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Patiño, Sandra Fernanda Suárez
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Semliki Forest Virus; BHK-21 cells; Células BHK-21; Fetal bovine serum; Glicoproteína do vírus da raiva; Green fluorescent protein; Hepatitis C virus non-structural protein 3; Meio livre de soro; Proteína não estrutural 3 do vírus da hepatite C; Proteína verde fluorescente; Rabies virus glycoprotein; Serum-free medium; Soro fetal bovino-SFB
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-25082016-145258/

Células eucariotas usadas como plataforma de expressão de proteínas recombinantes são geralmente cultivadas com soro fetal bovino (SFB), porém, abordagens biotecnológicas atuais sobre cultura de células devem evitar o uso deste suplemento, devido a problemas de custo, variações entre os lotes e risco de contaminação. Assim, nosso objetivo foi expressar as proteínas recombinantes: GFP (proteína verde fluorescente), NS3 (proteína não estrutural 3 do vírus da hepatite C) e RVGP (glicoproteína do vírus da raiva) em células BHK-21 adaptadas em meios livres de soro fetal bovino (SFM) usando o sistema de expressão baseado no Semliki Forest Virus (SFV). Os resultados do presente trabalho mostraram que células adaptadas em SFM cresceram de forma eficiente, produziram mais partículas virais recombinantes de SFV do que células suplementadas com soro, sendo que estas partículas virais podem ser usadas diretamente para imunização, pois garantiram uma amplificação e expressão eficiente das diferentes proteínas dentro da célula hospedeira.