Análise de células Natural Killer de memória e da resposta antiviral de células T CD8+ na infecção por SARS-CoV-2

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Silva, Sarah Cristina Gozzi e
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: antiviral factors; fatores antivirais; linfócitos T; memory NK; NK de memória; SARS-CoV-2; T lymphocytes
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42133/tde-15022023-163856/

A COVID-19, doença infecciosa causada pelo SARS-CoV-2, disseminou-se em escala pandêmica. A infecção pelo vírus pode evoluir de maneira assintomática ou gerar sintomas mais graves, influenciada pela presença de comorbidades. A linfopenia nos pacientes acometidos com a COVID-19 de acordo com a gravidade dos sintomas é recorrente, incluindo diminuição da frequência de células NK (Natural Killers). Contudo, o perfil de células T CD4&#43 , T CD8&#43 e NK quanto a funcionalidade ainda não bem foram elucidados na infecção aguda pelo SARS-CoV-2. A proposta deste estudo é avaliar o perfil fenotípico e funcional de linfócitos T e células NKs, incluindo células NK de memória, em pacientes com quadro moderado e grave/crítico de COVID-19. No período de pandemia, iniciamos as análises em uma coorte de 79 pacientes confirmados com SARS-CoV-2 (31 casos moderados e 48 casos graves/críticos) procedentes do HC-FMUSP. Observamos nesta coorte prevalência de óbito de 6,5% nos quadros moderados e de 31,3% nos quadros graves. As comorbidades mais prevalentes foram hipertensão arterial sistêmica e distúrbios cardíacos. Apesar da linfopenia, evidenciamos aumento da expressão de marcadores de ativação em linfócitos T (CD28, CD38 e HLA-DR), assim como aumento da frequência de células T CD4&#43 , T CD8&#43 e células NK que expressam a proteína de checkpoint imunológico, PD-1, nos pacientes com quadro grave/crítico em relação aos controles. Em contraste com a diminuição percentual de células NK, houve aumento da frequência de NK de memória, NKG2C&#43 CD57&#43 , tanto nos casos moderados quanto graves/críticos da infecção. Já no tecido cutâneo de pacientes que foram a óbito em decorrência da doença, detectamos na região dérmica aumento da expressão de NKG2C e granzima. Considerando que a expansão desta população está relacionada com a exposição ao citomegalovírus (CVM), houve elevação dos títulos de anticorpos IgG anti-CMV nos pacientes com COVID-19, que se normalizou nos indivíduos convalescentes. Quanto ao perfil citotóxico das células mononuclares do sangue periférico, já na condição basal, foi observado aumento da resposta de células TCD4&#43 e NK, entretanto com o estímulo com PMA e Ionomicina pouco se alterou. Já os linfócitos T CD8&#43 mostraram diminuição da resposta citotóxica, evidenciando um perfil de exaustão nos pacientes com COVID-19 grave. Além disto, foi evidenciado aumento da expressão constitutiva de genes associados a via das caspases, inflamassoma e fatores antivirais em linfócitos T CD8+ purificados de pacientes com COVID-19 grave, e redução da expressão de TNF- &#945. O perfil citotóxico, por células NK de memória e células T CD4&#43 citotóxicas, pode compensar a disfunção/exaustão das T CD8&#43 , contudo presença de células com potencial citotóxico foram detectadas na derme de autopsias de pacientes COVID-19. Estes achados podem fornecer um maior entendimento dos fatores associados a gravidade da infecção aguda por COVID-19.