Efeitos do anti-IL-17 na inflamação, remodelamento estresse oxidativo em um modelo de sobreposição ASMA-DPOC (ACO)

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Camargo, Leandro do Nascimento
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Asma; Asthma; Doença pulmonar obstrutiva crônica; Estresse oxidativo; Interleucin-17; Interleucina 17; NF-kappa B; Oxidative stress; Pulmonary disease chronic obstructive
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5165/tde-28112024-133857/

INTRODUÇÃO: Envolvida no recrutamento de neutrófilos, a IL-17 modula as respostas inflamatórias, funcionais e atua na modulação do remodelamento das vias aérea e dos septos alveolares na asma e DPOC. Atualmente os tratamentos com anticorpos monoclonais são importantes para pacientes com asma de difícil controle. No entanto, para pacientes que cursam com sobreposição asma e DPOC, as opções de tratamentos ficam limitadas, necessitando de novas alternativas terapêuticas. A IL-17 pode ser uma peça-chave nas alterações encontradas nos pacientes com sobreposição (ACO), porém até o presente momento não existem estudos abordando os efeitos da inibição da IL-17 na ACO. OBJETIVO: No presente estudo avaliou-se os efeitos do anti-IL-17 nas alterações presentes nas vias aéreas e nos septos alveolares em um modelo de sobreposição asma-DPOC. MÉTODOS: Cinquenta e seis camundongos macho da espécie BALB/c foram sensibilizados com ovalbumina e/ou receberam elastase (grupos OVA, ELA e ACO), seguidos de tratamento com anti-IL- 17 ou veículo. Ambos os protocolos tiveram duração de 28 dias. Após 24h do término dos protocolos experimentais, os animais foram anestesiados e traqueostomizados para avaliação da hiperresponsividade à metacolina (MCh) e do fluído do lavado broncoalveolar (FLBA). Por morfometria, avaliou-se o diâmetro alveolar médio (LM) e o recrutamento de células positivas para citocina pró-inflamatória (IL-6), antiinflamatórias (IL-10) e linfocinas (IL-1 IL-2, IL-4, IL-5, IL-13 e IL-17). Por imuno-ensaio (ELISA) foi dosado os níveis proteicos de IL-1 IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 e IL-17. Ainda foram avaliados elementos da matriz extracelular como a quantificando a fração de volume de fibras colágenas totais e seus subtipos (I, III e V), a expressão celular de MMP-9, MMP-12 e TIMP-1 e TGF-, resposta das vias de estresse oxidativo pela expressão celular de INOS e fração de volume 8-iso-PGF2 e vias sinalizadoras com expressão celular de FOXP3 e NF-kB. Os dados foram analisados pelo teste Análise de Variância um fato (One way ANOVA) seguido por Holm-Sidak e foi considerado significativo um p<0,05. RESULTADOS: O tratamento com anti-IL-17 nos grupos OVA anti-IL-17, ELA anti-IL-17 e ACO anti-IL-17 reduziu a resposta máxima de aumento da resistência e de elastância do sistema respiratório quando comparados aos grupos OVA, ELA e ACO (p<0,05 para todas as comparações). Houve também redução no número de células inflamatórias totais e de neutrófilos, linfócitos, eosinófilos e macrófagos no BALF no grupo ACO anti-IL-17 quando comparado ao grupo ACO (p<0,05 para todas as comparações). O tratamento com anti-IL-17 atenuou as expressões celulares de CD4+, IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13 e IL-17 (células/104m2) na via aérea e no septo alveolar quando comparado ao grupo ACO (p<0,05, para todas as comparações, exceto para IL-4 e IL-10 no septo alveolar). Nos marcadores de remodelamento da matriz extracelular, houve atenuação da expressão celular no grupo ACO anti-IL-17 nos seguintes marcadores, via aérea e septo alveolar: fração de volume de colágeno total, colágeno I, III, IV, expressão de MMP-9, MMP-12, TIMP-1 e TGF-, quando comparado ao grupo ACO (p<0,05, para todas as comparações, exceto para colágeno total no septo alveolar). Em relação ao estresse oxidativo, na via aérea e no septo alveolar, observamos que a expressão celular de iNOS e fração de volume de 8-iso-PGF2 estava reduzida no grupo ACO anti-IL-17 comparado ao grupo ACO (p<0,05, para todas as comparações) assim como o NO exalado (p<0,05). A expressão celular para FOXP3 e NF-kB nas vias aéreas e no septo alveolar foram reduzidas no grupo ACO anti-IL-17quando comparado ao grupo ACO (p<0,05 para todas as comparações). O diâmetro alveolar médio foi reduzido no grupo ACO anti-IL-17 comparado ao grupo ACO (p<0,05). CONCLUSÃO: A inibição da IL-17 contribui para o controle da inflamação Th2/Th17, controle do remodelamento da matriz extracelular e do estresse oxidativo em um modelo de sobreposição de ASMA-DPOC (ACO). Os mecanismos envolvidos dependem da modulação de NF-KB e FOXP3. Estes dados sugerem fortemente a importância da IL-17 neste modelo como sendo um relevante alvo terapêutico