Detecção e clonagem de genes de biossíntes de 1,3-propanodiol a partir de glicerol em Klebisiella pneumoniae GLC29.

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Flora, Amanda Billia
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: 1,3-propanediol; 1,3-propanodiol; Klebsiella pneumoniae; Análise de fluxos metabólicos; Biodiesel; Biologia molecular; Glicerol; Glycerol; Isocitrato desidrogenase NAD dependente; Metabolic flux analysis; Molecular biology
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-16032016-101520/

O 1,3-propanodiol é um composto produzido a partir da fermentação do glicerol por bactérias como a do gênero Klebsiella e que pode ser utilizado para diversas aplicações na indústria, como a produção de PTT (politrimetileno tereftalato). Esse trabalho focou na produção de 1,3-propanodiol utilizando os genes que codificam as enzimas da via retirados de uma cepa de Klebsiella previamente isolada (GLC29). Os genes foram inseridos em um plasmídeo e este em cepa hospedeira de Escherichia coli com alteração na afinidade da enzima isocitrato desidrogenase pelo seu cofator. A enzima foi modificada no genoma da bactéria e utiliza como cofator NAD em vez do NADP original. Ensaios preliminares em agitador rotativo mostraram uma melhoria de produção da cepa mutada em comparação com a Escherichia coli selvagem. Em ensaios em biorreator, variando a concentração de oxigênio dissolvido no meio, a cepa mutante apresentou uma produção 25% maior que a cepa selvagem na condição de maior produção com 5% de oxigênio dissolvido.