Aplicações da espectroscopia de dicroísmo circular e da tensiometria em monocamadas de Langmuir no estudo de proteínas e peptídeos antimicrobianos

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Sousa, Victor Klein de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Circular Dichroism Spectroscopy; Espectroscopia de Dicroísmo Circular; Langmuir monolayers; Método Tipo-Monte Carlo; Monocamada de Langmuir; Monte Carlo-Like Method; Síntese de peptídeos em fase sólida; Solid Phase Peptide synthesis; Tensiometria; Tensiometry
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/43/43134/tde-05082021-152747/

A espectroscopia de dicroísmo circular (CD) é uma técnica biofísica amplamente difundida e utilizada para fornecer informações estruturais a respeito de proteínas e peptídeos. Compostos quirais apresentam espectro de CD característico devido à diferença de absorção da luz circularmente polarizada à direita e à esquerda. Do espectro de CD de uma proteína, extraem-se informações acerca de sua estrutura secundária no ambiente e nas condições em que se encontra, sendo possível estimar as frações de cada tipo de estrutura secundária presentes na molécula. Todavia, assim como qualquer técnica experimental, deve-se ter cautela na escolha dos parâmetros de entrada ao coletar um espectro de CD, visto que eles afetam diretamente a qualidade do sinal obtido. No primeiro capítulo deste trabalho, foi investigado como a escolha e a variação de sete parâmetros de entrada afetam os resultados de CD. Um método Tipo-Monte Carlo foi implementado para estimar as incertezas nas porcentagens de estrutura secundária predita. Uma mudança sutil em alguns parâmetros foi capaz de afetar significativamente as análises de CD, em destaque as variações na concentração da amostra e na presença de aditivos (tais como os íons cloreto) na solução. No segundo capítulo deste trabalho, descreve-se a implementação das reações de síntese de peptídeos em fase sólida no IFUSP, e a interação do peptídeo Pln149 com diferentes monocamadas fosfolipídicas, utilizando medidas de pressão superficial em monocamadas de Langmuir. Estes resultados evidenciam que a Pln149 pode interagir tanto com monocamadas lipídicas negativamente carregadas (o que já se conhecia previamente) quanto com superfícies zwitteriônicas.