Efeito da Anexina A5 na interação entre íons Ca2+ e membranas contendo DPPS

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Ferreira, Claudio dos Reis
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Anexina A5; Annexin A5; Cálcio; Calcium; DPPS
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-24012022-114658/

A mineralização do osso é um processo dirigido por vesículas da matriz (VMs), que produzem e liberam as primeiras partículas de mineral na matriz extracelular colagenosa. Acredita-se que a Anexina A5 (AnxA5) desempenhe um papel importante na nucleação de mineral dentro das VMs influenciada por cálcio e PS. O trabalho buscou avaliar a estabilidade de membranas compostas por DPPC e DPPS em meios contendo íons Ca2+, assim como o efeito da AnxA5 sobre essa estabilidade e sua relevância para o processo de mineralização óssea. O efeito de íons Ca2+ sobre membranas constituídas por DPPC puro, 10%DPPS, 20%DPPS (porcentagens molares) e DPPS puro foi avaliado a partir de monocamadas de Langmuir (isotermas π-A e microscopia de fluorescência) e lipossomos (calorimetria de varredura diferencial, DSC; e espalhamento dinâmico de luz, DLS). Os dados obtidos por meio de DSC e DLS mostram que concentrações de cálcio na faixa de 0,5-2,0 mM induzem a formação de domínios lipídicos ricos em DPPS e que promovem a desestabilização de lipossomos. No entanto, o efeito fusogênico promovido pelos íons Ca2+ é minimizado na presença de AnxA5 (fusão que outrora ocorria em 0,5 mM passa a ocorrer a partir de 1,0 mM na presença da proteína). As imagens de microscopia mostram a formação de pequenos domínios lipídicos em monocamadas de DPPC puro em meio contendo íons Ca2+, que se tornam maiores na presença de DPPS e ainda maiores na presença de AnxA5. Os resultados indicam que a AnxA5 pode ser fundamental para a nucleação de mineral dentro de VMs, atuando na estabilização de regiões abundantes em DPPS para que ocorra acúmulo suficiente de cálcio e fosfato, necessários para a formação e crescimento do mineral.