Estudo de parâmetros microbianos em múltiplas sessões de terapia fotodinâmica antimicrobiana

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Soares, Jennifer Machado
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Antimicrobial photodynamic therapy; Curcumina natural; Faringotonsilites; Limiar de dose; Natural curcumin; Pharyngo-tonsillitis; Terapia fotodinâmica antimicrobiana; Threshold dose
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/76/76132/tde-14102019-163039/

A Faringotonsilites consiste na inflamação infecciosa da tonsilas palatinas e da faringe, são documentados mais de 600 milhões de caso por ano, sendo que 30% dos casos bacterianos são causados pela bactéria gram positiva S. pyogenes e o principal tratamento é o uso de antibiótico. Atualmente, infecções recorrentes em seres humanos, como a infecção de garganta podem ser de difícil tratamento caso o patógeno infectante possua mecanismo de resistência que invalide a atividade do antibiótico. Como alternativa aos antibióticos destaca-se a terapia fotodinâmica antimicrobiana (TFDA), que atua inativando a bactéria sem que a via de ação seja invalidada. Apesar dos seus benefícios, a TFDA possui limitações que podem influenciar nos protocolos de tratamentos, principalmente para múltiplas sessões. Portanto, o objetivo do trabalho consistiu em estudar a resposta bacteriana e a avaliar o potencial de desenvolvimento de resistências em múltiplas sessões de TFDA. Foi estudado a padronização da concentração do fotossensibilizador (FS) pela taxa de incorporação. As bactérias do gênero Streptococcus foram incubados com a curcumina natural a 37°C em diferentes formulações, sendo a de xarope (água + sacarose) e a álcool+DMSO. Posteriormente foi centrifugado e o sobrenadante coletado para análise da absorbância. Para os experimentos de TFDA, a bactéria incubada com xarope de curcumina (2,25 mg/ml), foi submetida a irradiação em uma Biotable ® com comprimento de onda de 450 nm, com flência de 0 - 115, 2J/cm2. Posteriormente as amostras foram diluídas e semeadas em placas de Petri com meio de cultura ágar BHI. As placas foram incubadas em estufa a 37°C por 24 horas para a realização da contagem das unidades formadoras de colônias por mililitros (UFC/ml). As bactérias sobreviventes foram congeladas foram utilizadas para o próximo ciclo de tratamento e análise de aderência de biofilme (cristal violeta), sensibilidade do antibiótico (Kirby-Bauer), análises fenotípica (FTIR). A incorporação porcentual média de curcumina em xarope para S. mutans foi de 24%, assim como para S. pyogenes foi de 26%, por fim para o isolado clínico foi de 27%. Com o uso do xarope de curcumina na concentração de 2,25 mg/ml e luz no comprimento de onda de 450 nm aplicada em S. pyogenes e isolado clínico obteve-se um limiar de dose para 10 sessões de TFDA de 70, 2J/cm2 e 71, 7J/cm2, respectivamente. O perfil de redução bacteriana permaneceu similar ao longo dos ciclos para ambas culturas. As colônia sobrevivente, entretanto, apresentaram diminuição na adesão de biofilme e na taxa de incorporação do FS, mas não tiveram diferenças significativas no fenótipo de algumas biomoléculas. O presente estudo sugere a não resistência ao mecanismo de ação do tratamento, que se manteve eficaz nas dosagens estudadas. Esse resultado corrobora com a literatura de que o modo de ação da TFDA não perde a eficiência em múltipla sessões.