Caracterização cinética e molecular da (Na+, K+)-ATPase do tecido branquial de Callinectes danae submetido a estresse por cobalto

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Costa, Maria Izabel Cardoso da
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: (Na+ K+)-ATPase; Callinectes danae; Cobalt; Cobalto; Heavy metals; Metais pesados
• Link de acesso: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-07102022-075042/

A poluição por metais é uma preocupação para a saúde dos ambientes marinhos devido a ampla aplicabilidade, e o Callinectes danae é uma das espécies de caranguejos recomendadas como biomonitor ambiental, capaz de fornecer respostas biológicas em áreas contaminadas. O cobalto é um metal essencial em alguns processos celulares e, como não é regulado nos crustáceos decápodes, pode biomagnificar ou bioacumular na cadeia trófica. O tecido branquial é o primeiro órgão em contato com poluentes externos. Assim, a (Na+, K+)-ATPase branquial pode ser usada como sistema modelo na investigação dos efeitos tóxicos de íons metálicos. Esse trabalho faz parte da linha de pesquisa \"(Na+, K+)-ATPase como marcador molecular da adaptação dos crustáceos a ambientes de diferentes salinidades\" e tem como objetivo avaliar o efeito do íon cobalto na atividade K+ -fosfatase da (Na+, K+)-ATPase do tecido branquial de C. danae usando o substrato sintético p-nitrofenil fosfato. Estudos anteriores confirmam que esse substrato possui uma estrita correlação com o ATP, substrato fisiológico, na atividade da (Na+, K+)-ATPase. Além disso, a utilização desse substrato sintético resulta em procedimentos experimentais mais simples comparados ao substrato fisiológico. Os resultados obtidos nesse trabalho revelaram que o cobalto estimula a atividade K + -fosfatase da enzima em substituição ao magnésio. Entretanto, o cobalto inibe a atividade K + -fosfatase da enzima quando na presença de magnésio. Comparada com o magnésio (K0,5= 2,98 ± 0,59 mmol L-1 ) a afinidade da enzima pelo cobalto é cerca de 4 vezes maior (K0,5= 0,60 ± 0,23 mmol L-1 ). O magnésio consegue deslocar o cobalto ligado à enzima até concentrações menores que 2 mmol L-1. O cobalto não interfere na inibição da atividade K+ - fosfatase da enzima pelo sódio (IC50 ≈16 mmol L-1 ), nem a inibição pela ouabaína (KI ≈ 2 mmol L-1 ).