Identificação de genes envolvidos na síntese de polihidroxialcanoatos em Burkholderia cepacia linhagem IPT64.

• Ano de defesa: 2008
• Autor(a) principal: Caulkins, Juliana Carvalho de Arruda
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: b-cetotiolase; <font face=\"symbol\">b-cetotiolase; Burkholderia cepacia; Biodegradable polymers; Biotechnology; Biotecnologia; Genética bacteriana; Genetics bacterial; PHA- Sintase; PHA-synthase; PHB; Polihidroxialcanoatos; Polímeros biodegradáveis; Polyhydroxyalkanoates
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-06082009-111247/

Os polihidroxialcanoatos (PHAs) são poliésteres acumulados por microrganismos como material de reserva. O conhecimento das vias bioquímicas e enzimas envolvidas na biossíntese e degradação dos PHAs é uma importante ferramenta para auxiliar na produção industrial. A linhagem Burkholderia cepacia IPT64 é capaz de acumular uma blenda composta de P(3HB) e P(3H4PE) a partir de sacarose. Este trabalho está focado em duas das principais enzimas envolvidas na biossíntese de PHAs: a b-cetotiolase (phaA) e a PHA sintase (phaC). A primeira está associada à especificidade pelo substrato, e a segunda é considerada a enzima chave na síntese de PHAs. Neste trabalho a linhagem mutante phaC foi avaliada quanto à atividade enzimática de PHB sintase, que se constatou ter sido perdida. A presença de mais de uma tiolase no genoma de B. cepacia foi detectada. A inativação do gene phaABc identificado anteriormente, bloqueou totalmente a síntese de P(3HB), e não promoveu o aumento da quantidade total de polímero. Este resultado indica que a tiolase identificada é responsável direta do acúmulo de P(3HB). Outra indicação é que não há uma competição das vias de síntese dos dois polímeros P(3HB) e P(3H4PE), já que não houve alteração na quantidade de P(3H4PE) acumulado, mesmo quando P(3HB) deixou de ser acumulado.