Clonagem, expressão e purificação de proteínas candidatas vacinais de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni. Avaliação de atividades imunogênicas e características funcionais.

• Ano de defesa: 2009
• Autor(a) principal: Lopes, Luana Melo
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Salmonella; Antígenos de bactérias; Antigens of bacteria; Biotechnology; Biotecnologia; Leptospirose; Leptospirose animal; Leptospirosis; Leptospirosis animal; Vaccines.; Vacinas
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-12082009-103417/

A leptospirose é uma zoonose mundial causada por bactéria do gênero Leptospira. O desenvolvimento de uma vacina de subunidade eficaz seria de grande interesse em saúde pública. Propusemos investigar 4 antigenos de Leptospira interrogans srv Copenhageni, genes LIC12659, LIC12660, LIC12631 e LIC10868, os quais foram amplificados e clonados nos vetores de expressão pAE e pAEsox. As proteínas VapB, VapC, VapBC e Sph2 foram expressas em E. coli e em salmonela SL3261 e purificadas por cromatografia de afinidade a metal. As atividades hemolítica de Sph2 e ribonucleásica de VapC não foram evidenciadas, possivelmente devido a diferenças estruturais entre as proteínas recombinantes e as nativas. Os clones de E. coli com os genes do módulo toxina-antitoxina vapBC sofreram os efeitos de inibição (vapC) e recuperação (vapBC) de crescimento, como descrito. As proteínas recombinantes, VapB purificada ou em salmonlea e Sph2, mostraram-se imunogênicas em camundongos e em hamsters. A imunização com Salmonela-VapB determinou a melhor proteção no teste de desafio.