BKM-120 reduz a viabilidade celular e secreção de hormônio adrenocorticotrófico em linhagem celular de tumores corticotróficos de camundongo AtT-20/D16v-F2

• Ano de defesa: 2019
• Autor(a) principal: Oliveira, Helen Alves de
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Cell cycle; Ciclo celular; Corticotrofinomas; Corticotrophinoma; Expressão gênica; Gene expression; PI3K
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17138/tde-10032020-135015/

Doença de Cushing (DC) é resultante da hipersecreção do hormônio adrenocorticotrófico (ACTH) secundário à presença de um adenoma corticotrófico hipofisários, levando ao hipercortisolismo. Diferentes estratégias terapêuticas são disponíveis, entretanto, uma significativa parcela dos pacientes não atinge a remissão da doença. Faltam, principalmente, terapias medicamentosas direcionadas para a hipófise. A via PI3K / AKT desempenha papel essencial em diferentes processos celulares, incluindo sobrevivência celular, proliferação, diferenciação, organização do citoesqueleto e transporte de glicose. Essa via está frequentemente ativada em neoplasias, em humanos, incluindo os tumores hipofisários, o que proporciona oportunidades de intervenção terapêutica. O fármaco BKM120, inibidor seletivo de PI3K, exerce efeitos antiproliferativos e citotóxicos em tumores sólidos, via inibição seletiva de AKT. Neste estudo, examinamos os efeitos de BKM120, em linhagem celular AtT-20/D16v-F2, proveniente de tumor corticotrófico de camundongos. Métodos: Os efeitos do BKM120 na linhagem celular foram avaliados através da quantificação de hormônio adrenocorticotrófico por quimioluminescência, da quantificação da expressão dos genes Cdkn1b, Ccne1, Ccnd1, Cdk4, Cdk2, Rb1, Myc por reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real, da quantificação da expressão protéica de AKT, CDKN1B, p70 S6 cinase e p85 S6 cinase por Western Blot, da análise da viabilidade celular por ensaio de proliferação celular não radioativo, da análise das fases do ciclo celular por citometria de fluxo e análise de apoptose por ensaio de anexina em citomêtro de fluxo. Resultados: O tratamento das células AtT-20/D16v-F2 com BKM120 diminuiu os níveis de ACTH no sobrenadante das células AtT-20 / D16v-F2. BKM120 também diminuiu a proliferação celular em células AtT-20/D16v-F2 de forma dose-dependente. Além disso, o tratamento com BKM120 causou aumento transitório na expressão de Cdkn1b e indução de parada no ciclo celular em G0-G1 Conclusão: Os estudos in vitro com BKM120 demostram supressão da síntese e secreção de ACTH e da proliferação celular de células AtT-20/D16v-F2, provenientes de tumor corticotrófico de camundongos, sugerindo estudos in vivo com o fármaco BKM120 devam ser testados, por apresentar potencial para o tratamento medicamentoso de tumores corticotróficos humanos.