Transferência gênica in vivo por meio de eletroporação em músculo sóleo de ratos wistar.

• Ano de defesa: 2008
• Autor(a) principal: Ono, Hélcio Yogi
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
• Palavras-chave em Português: Eletroporação; Eletroporation; Gene transfer; Green fluorescence protein; Músculo esquelético; Plasmid; Plasmídeos; Proteínas de fluorescência verde; Skeletal muscle; Sóleo; Soleus; Transferência de genes
• Link de acesso: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42134/tde-09092008-113238/

A proposta deste trabalho é a padronização do método de eletroporação direta (utilizando eletrodos) em músculo sóleo de ratos wistar. Deste processo físico, pudemos variar a voltagem, o número de pulsos e duração do pulso. O objetivo principal foi à busca de um parâmetro ideal onde deveria haver a menor lesão tecidual com a maior quantidade de expressão do GFP. Métodos de análise (fluorescência e histologia) foram utilizados para a determinação da eficiência de transferência de genes, onde se considerou a razão entre as fibras musculares sadias emissoras fluorescência e o número total de fibras sadias. Como resultado, atingimos a taxa de eficiência de (50,3 ± 20%) em transferência de genes, utilizando a voltagem de 25 V, trem de 8 pulsos com duração de 20ms e freqüência de 1Hz. A possibilidade de interferir na função deste músculo abre a perspectiva de se estudar o papel de certos genes na plasticidade muscular esquelética, especialmente no crescimento muscular longitudinal.