Aplicação da técnica de reação em cadeia da polimerase fluorescente quantitativa (QF-PCR) para detecção de aneuploidias em gestações de alto risco, fetos mortos sem diagnóstico e material de restos placentários de múltiplas perdas gestacionais

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Machado, Andryele Zaffari
• Orientador(a): Leistner-Segal, Sandra
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Aberrações cromossômicas; Técnicas de diagnóstico molecular; Diagnóstico pré-natal; Aneuploidia; Gravidez de alto risco; Morte fetal
• Palavras-chave em Inglês: Chromosome aberrations; Molecular diagnostic; Prenatal diagnosis
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/234592

Introdução: As aneuploidias mais comuns, juntas, representam mais de 80% das anormalidades cromossômicas diagnosticadas no período pré-natal. Cerca de 15-25% das gestações acabam perdidas até o terceiro trimestre, sendo as anormalidades cromossômicas responsáveis por cerca de 50% dos abortamentos espontâneos. Quando encontrados no screening pré-natal indícios de aneuploidia a investigação citogenética torna-se fundamental. O uso de técnicas alternativas que possibilitam rapidez diagnóstica associada a alta sensibilidade vem se tornando uma realidade. A técnica de QF-PCR é uma técnica molecular capaz de detectar as principais aneuploidias em tecidos fetais em até 48 horas, não necessitando de cultivo celular para ser realizada. Objetivo: verificar a eficiência da metodologia QF-PCR em DNA de diferentes amostras, que não puderam ser analisadas previamente por técnicas citogenéticas, a fim de detectar aneuploidias. Metodologia: estudo transversal realizado no período de 2019 à 2020 de 25 amostras de DNA fetal armazenados em biorrepositório (12 eram de biópsia de cordão umbilical, 2 de vilosidades coriônicas de material de aborto, 6 de biópsia de pulmão, 1 de líquido amniótico, 1 de sangue e 3 de outros materiais), utilizando kit comercial para análise dos cromossomos 13,18,21,X e Y.Resultados: das 25 amostras analisadas, duas apresentaram razões alélicas indicativas de trissomia do cromossomo 18 e as demais apresentaram resultado normal para os cromossomos analisados. Cinco amostras com diagnóstico de cariótipo já estabelecido foram utilizadas para a padronização do procedimento. Conclusão: a técnica aplicada mostrou-se eficaz para análise de diferentes materiais fetais, que não puderam ser analisados anteriormente por técnicas citogenéticas, além de detectar alterações cromossômicas numéricas em diferentes materiais fetais. Entretanto, os cromossomos avaliados se restringem aos marcadores incluídos em cada kit e não permite a análise cromossômica global. Para tal, é necessária a inclusão de kits adicionais não avaliados neste projeto.