Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2014 |
Autor(a) principal: |
Parizi, Luis Fernando |
Orientador(a): |
Vaz Junior, Itabajara da Silva |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Tese
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Não Informado pela instituição
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Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Não Informado pela instituição
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Palavras-chave em Português: |
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Link de acesso: |
http://hdl.handle.net/10183/96871
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Resumo: |
Cistatinas constituem uma família de inibidores reversíveis de cisteíno-peptidases, estando envolvidas em diversos processos fisiológicos nos carrapatos. Contudo, até o momento, existem poucos trabalhos com cistatinas de Rhipicephalus (Boophilus) microplus, carrapato responsável por prejuízos na pecuária em diversos países. Nesse trabalho, foi analisado as sequências, o perfil transcricional, a localização tecidual, a afinidade por catepsinas, a antigenicidade e a imunogenicidade de prováveis cistatinas de R. microplus. As cinco sequências nucleotídicas analisadas contêm regiões codificadoras para os motivos característicos das cistatinas, além dos resíduos de cisteínas e o peptídeosinal pertencentes a esse grupo de inibidores. O perfil transcricional dos genes de cistatinas e a análise sorológica das cistatinas nativas detectaram diferentes níveis da presença desses inibidores em tecidos de ovo, larva, intestino, glândulas salivares, ovário e corpo gorduroso do carrapato. Três cistatinas foram expressas em Escherichia coli, sendo posteriormente purificadas por cromatografia de afinidade. Duas dessas cistatinas recombinantes apresentaram afinidades distintas para as catepsinas B, C e L, sugerindo o seu papel fisiológico diferencial durante o metabolismo do sangue ingerido e formação do ovo do carrapato, e também na modulação do sistema imune do hospedeiro. Através de análises in silico, regiões antigênicas das sequências de aminoácidos desses inibidores mostraram similaridade (54-92 %) com cistatinas homologas de Rhipicephalus spp., o que torna estas cistatinas de R. microplus possíveis alvos para o desenvolvimento de vacinas multiespécies. A imunogenicidade das cistatinas recombinantes foi evidenciada por análises in silico e sorológicas, apresentando uma reatividade cruzada entre as cistatinas através de epitopos comuns. Esses resultados ajudam a esclarecer o papel das cistatinas na fisiologia do R. microplus, e, assim, gerarem conhecimento para auxiliar no desenvolvimento de novas estratégias de controle desse parasito. |