Desenvolvimento de um protocolo de criopreservação seminal de Leiarius marmoratus

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Nicoleti, Eduardo Thomé
• Orientador(a): Streit Júnior, Danilo Pedro
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Pimelodidae; Metanol; Sêmen; Peixe; Criopreservação; Leiarius marmoratus
• Palavras-chave em Inglês: Pimelodidae; Methanol; Kinetic analysis; Semen; Fish
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/276259

A presente pesquisa avaliou desenvolver um protocolo de criopreservação espermática de L. marmoratus padronizado para servir tanto na produção de híbridos como na conservação ex situ da espécie. Vinte três machos (n=23) foram distribuídos em quatro experimentos onde amostras de sêmen foram coletadas, criopreservadas e submetidas a análises após seu descongelamento. O primeiro teste verificou qual o crioprotetor permeável juntamente com metodologia de descongelamento apresentou melhor desempenho sobre as amostras seminais da espécie. O segundo experimento, utilizando as melhores amostras do primeiro e segundo teste, verificou a ação de diferentes tempos de permanência em vapor de nitrogênio sobre o material criopreservado. O terceiro experimento verificou qual a concentração do melhor crioprotetor permeável apresenta os melhores resultados após descongelamento. Por fim, o último teste verificou qual o melhor crioprotetor impermeável apresenta melhor desempenho em conjunto ao crioprotetor permeável. As amostras de sêmen foram diluídas no meio testado (1:4), depois congeladas em recipiente com vapor de nitrogênio e armazenadas em nitrogênio líquido a -196°C. Os parâmetros de cinética, avaliados em todos os experimentos, pós-descongelamento foram realizados pelo sistema CASA e os resultados de análise de integridade da membrana (foi realizada no último experimento) foi obtido através de microscopia de fluorescência. Como resultado foi possível observar que: o tempo de 2 horas em vapor de nitrogênio não alterou a qualidade das amostras criopreservadas; as metodologias de 45°C por 5 segundos e 40°C por 8 segundos podem ser empregadas no descongelamento de amostras da espécie; o Metanol sem o uso da combinação de um crioprotetor impermeável, apresentou no geral, os melhores resultados nas análises cinéticas e na integridade de membrana. Assim, os testes in vitro mostraram que o Metanol pode ser empregado na criopreservação seminal de L. marmoratus, podendo ser utilizado no desenvolvimento de um banco de germoplasma ou em sistemas de produção de peixes brasileiros.