Análise do comportamento de um biofilme dual-espécie frente a ação do hipoclorito de sódio 2% e avaliação da influência de sua estrutura na ação química do hipoclorito de sódio, da clorexidina e do EDTA : um estudo in vitro

• Ano de defesa: 2017
• Autor(a) principal: Busanello, Fernanda Hoffmann
• Orientador(a): Só, Marcus Vinicius Reis
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Biofilmes; Hipoclorito de sódio; Clorexidina
• Palavras-chave em Inglês: Biofilms; Irrigant solutions; Visco-elastic; Optical coherence tomography
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/210672

Este estudo teve dois objetivos principais. Primeiro, investigar a influência da estrutura do biofilme no efeito antimicrobiano de três irrigantes endodônticos: hipoclorito de sódio (NaOCl) 2%, clorexidina (CHX) 2% e ácido etilenodiamino tetracético (EDTA) 17%. Segundo, avaliar o efeito químico de NaOCl 2% sob diferentes tempos e volumes, aplicados em um biofilme padronizado com uma superfície de contato realista. Na primeira parte do estudo, S. oralis J22 e A. naeslundii T14V-J1 foram cultivados em discos de hidroxiapatita revestidos com saliva, em três diferentes condições de crescimento: biofilmes com crescimento estático em ambientes confinados durante dez dias (10SB) e quatro dias (4SB) (biofilmes ricos em água) e biofilmes crescidos por compactação durante quatro dias (CDFFB) (biofilmes ricos em células). NaOCl 2%, CHX 2% e EDTA 17% e tampão adesivo (controle) foram aplicados com volume de 20 µl durante 60 segundos. As espécimes foram analisadas previamente por Tomografia de Coerência Óptica e, após a aplicação de antimicrobianos, avaliados por meio do Teste de Resistência à Baixa Compressão, Tomografia de Coerência Óptica, e Microscopia Confocal a Laser. Na segunda parte da investigação, S. oralis J22 e A. naeslundii T14V-J1 foram crescidos por compactação durante quatro dias em discos de hidroxiapatita revestidos com saliva (biofilmes ricos em células). As amostras foram analisadas previamente por Tomografia de Coerência Óptica. NaOCl 2% foi aplicado sobre a superfície dos biofilmes em quantidades de 20 µl e 40 µl durante os períodos de 60, 120 e 300 segundos e um tampão adesivo foi aplicado em quantidade de 20 µl por 60 segundos (controle). Após a aplicação das soluções, biofilmes foram avaliados por meio do Teste de Resistência à Baixa Compressão, Tomografia de Coerência Óptica, e Microscopia Confocal a Laser. Os resultados do estudo mostraram uma maior redução de altura da camada rígida de biofilme com a aplicação do NaOCl 2% em 4SB e 10SB do que CDFFB (p = .028 / .016) Biofilmes desafiados com CHX apresentaram contração estrutural, com maior intensidade em CDFFB (p=0,05) e maior quantidade de substâncias poliméricas extracelulares (p=0,03). Após a aplicação de EDTA 17%, os biofilmes de CDFF mostraram uma redução de altura (p = 0,022). Com relação aos diferentes volumes e períodos de tempos de aplicação de NaOCl 2%, observou-se que, com 20µl, não houve diferença significativa entre 60 e 120 segundos (p = 0,086). Após 300 segundos, dissolveu-se uma espessura maior de camada rígida da estrutura do biofilme em comparação com 120 segundos (p = 0,017). Ao se aplicar 40µl, observou-se que a altura da camada rígida do biofilme foi significativamente reduzida após 120 (p = 0,028) e 300 (p = 0,013) segundos em comparação com 60 segundos e a camada de superficial do biofilme remanescente foi significativamente maior após 300 s em comparação com 60 segundos (p = 0,013). A partir desse estudo, pode-se concluir que a Tomografia de Coerência Óptica apresenta-se como um método interessante, não invasivo, em tempo real, que permite avaliar a estrutura dos biofilmes antes e após a aplicação de soluções antimicrobianas. A estrutura do biofilme exerce uma influência sobre o efeito de diferentes antimicrobianos, os quais podem apresentar um efeito sobre o biofilme remanescente. Ainda, os aspectos do tempo de aplicação e do volume de irrigante devem ser levados em consideração na elaboração de estratégias efetivas para dissolver e interromper a estrutura do biofilme e / ou influenciar a estrutura do biofilme remanescente.