Nanoemulsões como sistemas de liberação de oligonucleotídeos anti-topoisomerase II de plasmodium falciparum

• Ano de defesa: 2012
• Autor(a) principal: Bruxel, Fernanda
• Orientador(a): Teixeira, Helder Ferreira, Fattal, Elias
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Plasmodium falciparum; Malária; Nanoemulsões; Oligonucleotídeos
• Palavras-chave em Inglês: Nanoemulsions; Oligonucleotides
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/10183/233379

La présente étude décrit des aspects technologiques, physico-chimiques et biologiques des complexes formés entre nanoémulsions cationiques et des oligonucléotides (ON) anti-topoisomérase II du Plasmodium falciparum. Les formulations ont été optimisées au travers d'un plan factoriel 23 complet. Deux formulations composées par des triglycérides à chaîne moyenne, de la lécithine de jaune d'oeuf et un lipide cationique oléylamine ou DOTAP ont été choisis en fonction de leur proprietés physicochimiques. ON phosphodiester ou phosphorothioate ont été adsorbés sur des nanoémulsions cationiques. Les isothermes d'adsorption indiquent une adsorption progressive des ON jusqu'à ce qu'un plateau soit atteint, décrit par un modèle d’adsorption de Langmuir. Il a été détecté une quantité plus élevé d’ON adsorbés sur des formulations contenant le DOTAP par rapport à celles constituées par oléylamine. Des évidences supplémentaires de l'adsorption des ON ont été démontrées par l'inversion du potentiel zeta. L’analyse topographique et morphologique des complexes, obtenue par microscopie électronique à transmission et à force atomique, suggère l’adsorption des ON sur les nanoémulsions. L'organisation strucutrale dans une phase lamellaire a été identifiée par diffraction des rayons X d'énergie dispersive. L’association des ON et l'hémolyse augmentent avec le rapport de charge de complexes sur les érythrocytes sains ou infectés par Plasmodium falciparum. Des sondes fluorescentes (coassociées dans les complexes: fluorescéine et rouge du Nil) ont été localisées dans les érytrocytes infectés dans les étapes tardives du cycle d’évolution des parasites par microscopie confocale. Dans des conditions non hémolytiques, un effet d'inhibition d'environ 80% de la croissance de P. falciparum et un retard du cycle du parasite ont été observés in vitro. Les résultats globaux montrent que les complexes ON/nanoemulsions cationiques peuvent represerter une stratégie prometteuse contre les infections par Plasmodium falciparum.