Avaliação de diferentes fotossensibilizadores na terapia fotodinâmica antimicrobiana no tratamento da doença periodontal induzida: estudo in vivo e in vitro.

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Sánchez Puetate, Julio Cesar [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Fotoquimioterapia; Biofilmes; Periodontite; Photochemotherapy; Biofilms; Periodontitis
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/193109

A Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana (antimicrobial Photodynamic Therapy – aPDT), tem sido utilizada como uma terapia coadjuvante na doença periodontal (DP). O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos antimicrobianos da aPDT, com os fotossensibilizadores Hipericina-glucamina (Hy-g) e Ftalocianina-glucamina (Ft-g), no tratamento e progressão da doença periodontal induzida experimentalmente em ratos, assim como sobre um modelo de biofilme multiespécie in vitro. Os micro- organismos avaliados foram Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis, ATCC 33277), Aggregatibacter actynomicetemcomitans (A. actynomicetemcomitans, JP2), Fusobacterium nucleatum (F. nucleatum, ATCC25586), e Streptococcus oralis (S. oralis, ATCC 35037). Dois estudos distintos foram conduzidos. No Estudo 1, foi avaliado in vivo a viabilidade dos micro-organismos mediante o modelo da doença periodontal induzida experimentalmente em ratos após 7 dias de indução da DP. Os animais foram divididos em 7 grupos experimentais (n=8): Grupo Controle; Ftalocianina-glucamina (Ft-g); Hipericina-glucamina (Hy-g); LED vermelho (LV, 655nm; 34 J/cm2); LED âmbar (LA, 590nm; 34,10 J/cm2); aPDT 1(aPDT-Hy-g + LA); aPDT 2 (aPDT-Ft-g + LV). Os animais foram eutanasiados com 7 e 30 dias após a aplicação dos tratamentos no período baseline. No Estudo 2, foi avaliado in vitro a viabilidade dos micro-organismos mediante o modelo de biofilme multiespécie, as amostras foram divididas em 8 grupos experimentais: Controle Negativo; Controle Positivo (clorexidina 0,12%); Ftalocianina-glucamina (Ft-g); Hipericina-glucamina (Hy-g); LED Vermelho (LED-V, 660nm; 39,65 J/cm2); LED Âmbar (LED-A, 590nm; 39,30 J/cm2); aPDT 1 (aPDT-Ft-g + LV); aPDT 2 (aPDT-Hy-g + LA), três experimentos independentes foram realizados em triplicata (n=9). Para os dois estudos foi analisada a quantificação individual dos micro-organismos pela técnica de qPCR combinada com Propidium Monoazide (PMA). Os dados foram submetidos a análise estatística (α=0,05). Os resultados do modelo in vivo no período baseline quando comparados os grupos aPDTs com o grupo controle negativo para P. gingivalis foram, no grupo controle (6,89 ± 0,11), aPDT 1 (6,74 ± 0,26), aPDT 2 (5,88 ± 0,42); para F. nucleatum foram, no grupo controle (9,98 ± 0,20), aPDT 1 (9,76 ± 0,42), aPDT 2 (9,10 ± 0,43*); para A. actynomicetemcomitans foram, no grupo controle (9,75 ± 0,54), aPDT 1 (10,25 ± 0,47*), aPDT 2 (9,57 ± 0,14); para So foram, no grupo controle (2,62 ± 0,30), aPDT 1 (2,28 ± 0,30*), aPDT 2 (2,12 ± 0,14*); no período de 7 dias para P. gingivalis foram, no grupo controle (6,08 ± 0,39), aPDT 1 (7,13 ± 0,18*), aPDT 2 (6,73 ± 0,35); para F. nucleatum foram, no grupo controle (8,39 ± 0,27), aPDT 1 (9,45 ± 0,29*), aPDT 2 (9,42 ± 0,11*); para A. actynomicetemcomitans foram, no grupo controle (8,75 ± 0,30), aPDT 1 (8,36 ± 0,27), aPDT 2 (8,44 ± 0,44); para So foram, no grupo controle (2,55 ± 0,26), aPDT 1 (2,66 ± 0,20), aPDT 2 (2,75 ± 0,28); no período de 30 dias para P. gingivalis foram, no grupo controle (6,98 ± 0,31), aPDT 1 (6,95 ± 0,39), aPDT 2 (6,67 ± 0,38); para F. nucleatum foram, no grupo controle (9,18 ± 0,59), aPDT 1 (9,41 ± 0,42), aPDT 2 (9,26 ± 0,33); para A. actynomicetemcomitans foram, no grupo controle (8,75 ± 0,34), aPDT 1 (8,39 ± 0,35*), aPDT 2 (7,80 ± 0,75*); para S. oralis foram, no grupo controle (2,62 ± 0,35), aPDT 1 (2,93 ± 0,44), aPDT 2 (2,98 ± 0,26). Os resultados do modelo in vitro quando comparados os grupos aPDTs com o grupo controle negativo para A. actynomicetemcomitans foram, no grupo controle negativo (8,77 ± 0,93), aPDT 1 (6,74 ± 0,74*), aPDT 2 (9,05 ± 0,70); para F. nucleatum foram, no grupo controle negativo (8,99 ± 0,84), aPDT 1 (7,42 ± 0,52*), aPDT 2 (12,24 ± 0,42*); para P. gingivalis foram, no grupo controle negativo (6,60 ± 0,33), aPDT 1 (5,77 ± 0,58*), aPDT 2 (7,63 ± 0,23); para S. oralis foram, no grupo controle negativo (8,81 ± 0,49), aPDT 1 (8,34 ± 0,65), aPDT 2 (9,78 ± 0,20).