Caracterização de espécies do gênero Rhodnius Stal, 1859 (Hemiptera, Reduviidae, Triatominae) pelo método MALDI-TOF-MS

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Souza, Éder dos Santos
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Triatominae; Rhodnius; Espectrometria de massas; MALDI-TOF-MS; Quimiometria; Mass spectrometry
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/193367

Triatominae são insetos hematófagos que transmitem a doença de Chagas. Entre os 19 gêneros da subfamília, aqueles com maior importância epidemiológica em relação à disseminação de Trypanosoma cruzi são Panstrongylus, Rhodnius e Triatoma. Dentre esses três gêneros, Rhodnius é o que apresenta maiores dificuldades para a definição específica, assim existe a necessidade de facilitar a identificação das espécies desse gênero. Neste estudo, a metodologia MALDI-MS foi utilizada para identificar 12 espécies de Rhodnius, dentre as 20 admitidas. A metodologia MALDI-MS permitiu a caracterização específica por meio da identificação de peptídeos e proteínas, a partir de quatro diferentes métodos de extração: A) Acetonitrila/ácido fórmico (ACN/AF), B) Acetonitrila/ ácido trifluoroacético (ACN/TFA), C) Isopropilamida/ácido fórmico (IPA/AF), e D) Metanol/ácido fórmico (MeOH/AF), e quatro tipos de matrizes MALDI/TOF: ácido α-ciano-4-hidroxicinâmico (CHCA), ácido sinápico (SA), 6-aza-2-tiotimina (ATT) e 2,6-di-hidroxiacetofenona (DHAP). Os experimentos foram realizados combinando os quatro solventes e quatro matrizes para selecionar a melhor extração/matriz de MALDI. A aplicação da técnica MALDI-TOF-MS, pela abordagem espectrométrica digital combinada com métodos quimiométricos foi capaz de distinguir com precisão as 12 espécies de Rhodnius. Assim, tendo em vista os resultados obtidos, a metodologia utilizada neste trabalho pode ser aplicada com rapidez, eficiência e para a identificação de espécies de Rhodnius.