Influência do tamoxifeno associado a quimioterápicos nos tecidos periimplantares

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Fiorin, Luiz Guilherme [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Tamoxifeno; Cultura de células; Moduladores seletivos de receptor estrogênico; Modelos animais; Tamoxifen
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/251979

O propósito do presente estudo foi avaliar a influência da ação secundária do tamoxifeno in vitro, na vitalidade e no metabolismo de células de linhagem de osteossarcoma humano (SAOS-2) e in vivo, avaliar sua influência associada ou não aos quimioterápicos cisplatina (CIS) ou 5-Fluorouracil (5-FU) na remodelação óssea de implantes osseointegrados instalados em tíbias de ratos. Para a parte in vitro, células SAOS-2 foram incubadas com meio de crescimento meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) a 37°C, em atmosfera contendo 5% de CO2. As amostras foram divididas em grupos que incluíram a presença/ausência de tamoxifeno e o uso/não uso de discos de titânio isoladamente e em combinação. Foram fabricados um total de 54 discos de Titânio (Ti). Os discos passaram por jateamento de CaMg(CO3)2, limpeza, descontaminação por plasma e posterior esterilização. O tamoxifeno foi utilizado na concentração de 2 μM. Foram avaliadas a vitalidade celular, o metabolismo, a mineralização e as taxas de colágeno. A taxa de síntese e mineralização de colágeno foi calculada em relação a um controle negativo. Para a parte in vivo, foram utilizadas 140 ratas, os animais receberam ovariectomia bilateral previamente (OVX), instalação dos implantes em tíbia bilateralmente e após 6 semanas foram divididos em dois grandes grupos (n=60), que receberam administração por gavagem de 0,5 ml de solução salina a 0.9% (SS) e 15mg/kg de citrato de tamoxifeno (TAM) por todo o período experimental e depois, em três subgrupos (n=10) de acordo com os agentes antineoplásicos. Foram administrados os agentes antineoplásicos CIS, 5-FU ou 0,5 ml de SS, via intraperitoneal, respeitando intervalo de 48 h entre as aplicações. Para CIS, 5 mg/kg e 2,5 mg/kg, e para 5- FU, 60 mg/kg e 40 mg/kg, respectivamente. Os animais também foram divididos em um grupo de controle negativo total que não receberam ovariectomia e receberam apenas SS via gavagem e intraperitoneal. Dez animais de cada grupo foram eutanasiados na 12ª, 20ª semana, as tíbias foram coletadas e fixadas em formaldeído tamponado 4% por 48h e destinadas randomicamente para processamento para análise do contato osso/implante (COI), ou processamento com desmineralização e inclusão em parafina para análises histométrica de porcentagem de tecido ósseo neoformado (PTON), histológica e imunoistoquimica para os marcadores TRAP, OCN e RUNX2. Outros espécimes foram fixados em glutaraldeído 2,5% e tampão cacodilato 0,1M para análise ultraestrutural de Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e elementar por Dispersão por espectroscopia de raio-x (EDS). O tamoxifeno e o titânio sozinhos causaram uma diminuição na vitalidade, no metabolismo, na síntese e na taxa de colágeno da linha celular SAOS-2. Quando associados TAM e Ti causaram uma ligeira diminuição na vitalidade, mas não no metabolismo, na síntese de colágeno e nas taxas de mineralização. Os grupos que receberam administração de Tamoxifeno apresentaram maior COI, maior PTON, maior sinalização positiva de RUNX-2 e OCN, menor sinalização de células TRAP-positivas. Os grupos também apresentaram maior taxa de Ca/P em comparação com suas contrapartidas que não receberam a administração de tamoxifeno. Apesar da influência positiva do tamoxifeno, ele não foi suficiente pra reverter os efeitos deletérios nos tecidos periimplantares dos quimioterápicos.