Análise da força de expressão de promotores pip-box de Xanthomonas citri subsp. citri

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Luana Cristina Amistá [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Expressão gênica; Cancro cítrico; Bactérias fitopatogênicas; Virulência microbiana
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11449/257168; https://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4498602T2&tokenCaptchar=03AFcWeA4UEKDwdyu91RtIKyIlwY40IrDh6Ng66mTrs89Cc6BAnsIms2mditRa3bpOALfOsNCStr1HIBcYvac6jdoECYu9ml5-wmwEoHPbq533fm8sRzLQ54uNCaH5uitdRPY-WuFg2ayQmqgWXfLf8u45PMUAMcG9FGHsp2u1F0YwtNqyORxNqJrhGd4MX2BL7lKjGUIjbQOBdvEPPTsPX5-EkIUkP5Q9WdzqcBQpGCUzhfNIFN_tfGvvO5Ii1kukyxN8MxxrE4lBc5lrs9w64lVHiOEgdy4-OiREsh4TEm7w1kmCL_Y4uj5rGJbcSZ3qGAlnZm3qfv3yvOMCJj0SrgPgsr5eEVQBMvPGh4oGsDefrhN5MxIrVn3U8SmfDhhmi9kx6hI_JiRiwI0rVppFG6VeBOAtvO329pv81E8rNMCQx8bq442EhTG6trBXLjEde5KFLGA8m8VcUV8eJLWVphTFNGiF1m1Qy9IEwZd5o7tjwvOT-bEQblRZX75uo0_w-O3Wb24dTc6QWRquHw_vTXZ2tODqiwIghKCEc_iqeqmgzVl8IpYbV11jwDQcXi3NigsYQetu5doijhpYicWooj0GlVyYFC79lirm1NV4uzonRd0W56E7gInHXMrKLidqyLIWrzXMM0NfK6KUl_M0_-iTQw0sna5rN5KRnWBy0GNTVbwiERrpYElahggo4Ko9oHExwUPsQkaTHumSXxyLnEg_FAPCa7eydhjwo8vUb6gpg0LUOX6ZHdWIrOiMASr0Dhe135JGNlCZG1csikadR7haPKLiGmqBhqJirRo4DrFRRP8-xHWngdq34i1WNBtrU0Uvo2CB5GW_UhCtw8b5r6nUbu4KaNkfmaSChQ4IP3jHTAxmCsge94I6SODH1LgEtvTQTfDPoA6nWCBsCHnscTBGI0I3cpg4bKYTcYTX926Ftl3EBkgI6v0

A bactéria Xanthomonas citri subsp. citri (X.citri) é o agente causal do cancro cítrico, responsável pela devastação de pomares inteiros em países produtores de laranja, incluindo o Brasil. Na literatura é descrito que diversas bactérias fitopatogênicas possuem, em locais específicos do genoma, uma sequência consenso localizada na região promotora denominada “PIP-box” (Plant-Inducible Promoter box). As caixas PIP são responsáveis pela ativação de uma ampla gama de genes, incluindo a expressão de fatores de patogenicidade e virulência durante interações planta-patógeno. Neste estudo, realizou-se a avaliação funcional e a análise da intensidade de expressão de possíveis promotores “PIP-box” que se encontram na região 5’ não traduzida dos genes XAC0360, XAC2370 e XAC2922 de Xanthomonas citri subsp. citri isolado 306 (X. citri 306). As sequências PIP-box putativas foram fusionadas à região 5’ da sequência do gene gfp no vetor de expressão pRMF e os vetores recombinantes foram inseridos em X. citri 306 por eletroporação. A quantidade de proteína GFP produzida pelas linhagens recombinantes de X. citri 306 como resultado da ativação de cada promotor PIP-box foi avaliada por microscopia de fluorescência em duas condições diferentes: crescimento por 20 horas em meio de cultura XVM2, que simula o apoplasto e conhecido como meio indutor de expressão de genes hrp, usando como controle crescimento em meio não indutor NYG; crescimento por 5 dias após inoculação em folhas de laranja doce ‘Pêra’. Os resultados das análises demonstraram que as sequências “PIP-box” foram capazes de dirigir a transcrição do gene gfp presente à jusante, e a análise estatística mostrou que há diferença significativa entre os promotores em relação à força de expressão. Além disso, há diferenças quando se compara a força de expressão de cada promotor em meio de cultura indutor e in planta.