Desenvolvimento de magneto-ELISA e imunossensor eletroquímico para análise de Legionella pneumophila e eletrodos semicondutores bioinspirados de WO3 para remoção de Candida parapsilosis em águas de rejeito de hemodiálise.

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Souza, Barbara Camila de Araújo
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Fotoletrocatálise; Candida parapsilosis; Legionella pneumophilla; Imunossensor; Eletrodos bioinspirados de trióxido de tungstênio; Desinfecção
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/194265

O uso da água no ambiente hospitalar tem despertado grande atenção pela probabilidade de ocorrência de patologias em decorrência da ingestão de águas contaminadas, pela excreção de medicamentos, pelo alto índice de microrganismo e espécies patogênicas nos esgotos hospitalarese etc. O presente trabalho investiga o desenvolvimento de eletrodos bioinspirados de trióxido de tungstênio sem e modificados com Ag (W/WO3 e W/WO3-Ag) e eletrodos nanoestruturados de W/WO3 formados por templates sintéticos e eletrodeposição. Estes eletrodos foram aplicados na desinfecção de águas de origem ambiental e hospitalar utilizando-se a técnica de fotoeletrocatálise. Todos os eletrodos foram caracterizados pelos métodos convencionais e os eletrodos W/WO3 e W/WO3-Ag, mostraram melhor atividade fotoeletrocatalítica para desinfecção do dialisato e do dialisado contaminados com Candida parapsilosis na forma planctônica e de biofilme sem adição extra de eletrólito em relação aos eletrodos W/WO3 convencionais. Após otimização do método, a desinfecção fotoeletrocatalítica das cepas em concentração de 1,0 x 106 UFC mL-1 em dialisato alcançou 99.99% de inativação após 1 min de tratamento sob potencial aplicado de 1,5 V vs. Ag/AgCl, irradiação UV/vis e nenhuma regeneração destas mesmo após mais de três semanas de incubação. Ainda foi observada alta remoção de carbono orgânico (60%) total (COT), eliminação da turbidez e redução da demanda química de oxigênio. A inativação, morte dos fungos e remoção dos orgânicos lixiviados da análise celular do microorganismo foi atribuída a ação dos radicais hidroxilas fotogerados no meio reacional. A desinfecção dos fungos em efluente proveniente da hemodiálise (dialisado), também alcançou 99.9% de desinfeçcão após 3 min de tratamento sob irradiação UV/Vis e 15 minutos sob irradiação na região do visível. Para biofilmes, alcançou-se 99,9% de inativação em tempos de tratamento superiores a 120 min, e remoção de COT de 60% das leveduras. Ainda neste trabalho apresentamos o estudo do desenvolvimento de dois métodos imunológicos para detecção de Leginella pneumophila. Foram usados o método de magneto-ELISA e biossensor impedimétrico usando ensaio imunológico entre L. pneumophila e os anticorpos monoclonais específicos para a bactéria que reagem com o epítopo LPS. A captura e pré-concentração da amostra foi feita utilizando-se partículas magnéticas e transdução óptica e eletroquímica, para os ensaios de magneto-ELISA e biossensor, respectivamente. Resultados mais satisfatórios foram obtidos para imunossensor impedimétrico, utilizando-se partículas magnéticas tosiladas com 450nm de tamanho modificadas com anticorpo Legionella Polyclonal Antibody genus depositadas sobre eletrodo compósito de grafite epóxi modificado por imã. Valores de LD = 59,91 UFC mL-1e LQ = 183,03 UFC mL-1 foram obtidos para detecção de L. pneumophila em meio aquoso. O método foi aplicado na determinação de LP em água de torneira e dialisato de hemodiálise, alcançando-se detecção de ao redor de 105 UFC mL-1, com recuperações superiores a 85%.