Instabilidade cromossômica em embriões equinos provenientes de injeção intracitoplasmática de espermatozoide (icsi)

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Scheeren, Verônica Flores da Cunha
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Zigoto; Centrossomo; Oócito; Aneuploidia; Equino; Zygote; Centrosome; Oocyte; Aneuploidy; Horse
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/236862

A injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) é um método estabelecido e amplamente utilizado para alcançar a fertilização de oócitos em tecnologias de reprodução assistida equina. A ICSI reúne diversas aplicações, como para éguas doadoras idosas, éguas que precisam ser sacrificadas ou que morrem repentinamente, animais com distúrbios do trato reprodutivo, sêmen de má qualidade, palhetas raras e/ou caras de sêmen congelado. No entanto, nem todos os oócitos fertilizados por ICSI sofrem clivagem e se desenvolvem em embriões viáveis. A primeira divisão mitótica no zigoto é bastante singular em comparação com a divisão mitótica em células somáticas. O oócito perde seus centríolos durante a oogênese e na fertilização, o espermatozoide reintroduz dois centríolos no oócito. Os mecanismos que impulsionam essas divisões pós-zigóticas propensas a erros ainda são pouco compreendidos. O objetivo deste estudo foi analisar a frequência e o tipo de defeitos de segregação cromossômica durante as primeiras divisões mitóticas de embriões de ICSI equinos. A imunofluorescência sistemática e a microscopia confocal foram realizadas em zigotos equinos fixados (n = 177 oócitos injetados) 24 horas após ICSI. Quarenta e nove zigotos estavam em mitose, 13 em fase pronuclear (26,5%), 11 em prófase ou pró-metáfase (22,4%), 14 em metáfase (28,5%) e 11 em anáfase ou telófase (22,4%). Os erros mais comuns observados nos zigotos em mitose foram centrossomos fragmentados e centrossomos mal posicionados. Concluímos que o centrossomo não é crucial para a montagem do fuso. Além disso, observamos uma alta incidência de fragmentação de material pericentrossomal. Isso poderia explicar por que os embriões de ICSI equinos ainda apresentam baixa eficiência quando comparados a outras espécies animais.