Caracterização biológica e molecular de isolados de vírus pertencentes ao gênero Tobamovirus provenientes de Capsicum annuum L.)

• Ano de defesa: 2003
• Autor(a) principal: Cezar, Márcia Aparecida [UNESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Pimentão; Virus; Virus - Identificação
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/97252

O objetivo deste trabalho foi caracterizar isolados de tobamovírus coletados em campos de produção comercial de pimentão e pimenta nas regiões de Lins, Sorocaba e Salto, Estado de São Paulo. A coleção de isolados foi submetida a testes sorológicos utilizando-se antissoros policlonais para o ToMV e PMMoV e em seguida à purificação biológica por meio de lesões monolesionais em Nicotiana glutinosa, onde algumas das lesões foram transferidas para Nicotiana cleevelandi, hospedeira multiplicadora de tobamovírus. Os isolados foram mantidos em plantas de Nicotiana cleevelandi por meio de sucessivas passagens mecânicas. Os isolados foram inoculados em uma série diferencial de Capsicum spp: C. annuum cv. ECW (L+L+); C. annuum cv. Magda (L+L+); C. annuum cv. Tisana (L1L1); C. frutescens cv. Tabasco (L2L2); C. chinense PI 159236 (L3 L3); C. chacoense PI 260429 (L4L4). Foram inoculados três plantas de cada genótipo diferencial no estádio de primeira folha verdadeira e estas avaliadas durante 21 dias. Realizou-se a identificação molecular destes isolados utilizando-se oligonucleotídeos universais e específicos para as espécies de TMV, ToMV e PMMoV em reação de RT-PCR de uma só etapa, utilizando-se a transcriptase reversa AMV e a Taq DNA polimerase. A especificidade dos oligonucleotídeos foi inicialmente avaliada por meio de comparação da seqüência nucleotídica dos oligonucleotídeos com a do genoma de espécies de tobamovírus disponíveis no Genbank.O teste biológico confirmou a presença de tobamovírus nas amostras coletadas a partir de pimentão e pimenta, entretanto não permitiu diferenciar as espécies de vírus presentes. De acordo com os resultados obtidos através da inoculação dos isolados em genótipos diferenciais, observou-se que os isolados Pe-01, Pe-03, Pe-05 e Pe-12... .