Susceptibilidade de Candida albicans resistente a fluconazol ao efeito fotodinâmica e inibidores dos sistemas de efluxo

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Vega Chacón, Yuliana del Pilar
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Proteínas de membrana transportadoras. Candidíase. Resistência microbiana á medicamentos. Antifúngicos. Fotoquimioterapia.; Membrane transport proteins. Candidiasis. Drug resistance. Antifungal agents. Photochemotherapy.
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/166350

Um dos principais mecanismos de resistência microbiana são os sistemas de efluxo, que transportam medicamentos antimicrobiano para fora da célula. A eficácia de alguns agentes de inibição dos sistemas de efluxo tem sido reportada para reverter a resistência microbiana e também para potencializar as terapias antimicrobianas. Além disso, métodos alternativos aos agentes antimicrobianos convencionais têm sido investigados, como a Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT). O objetivo desse estudo foi avaliar in vitro o efeito da aPDT e de dois inibidores de sistemas de efluxo microbiano (curcumina e verapamil) na resistência à inativação de C. albicans. Foram utilizadas duas cepas de C. albicans, uma susceptível (CaS) e outra resistente (CaR) a fluconazol. Os parâmetros de inativação fúngica foram determinados submetendo-se culturas planctônicas de ambas as cepas à curcumina, ao verapamil, ao fluconazol e também à aPDT (mediada pela curcumina 40 μM (14,73 μg/mL) e luz de LED azul de ≅455 nm a 5,28 J/cm2). As duas cepas foram cultivadas e tratadas associando-se os agentes de inibição do efluxo ao fluconazol em concentrações não letais. Os dados de UFC/mL foram analisados pelos testes paramétricos t de Student, ANOVA/Welch e post-hoc de Games-Howell e pelo teste não paramétrico de Mann-Whitney (α=0,05; n=12). Os resultados demostraram que aPDT promoveu uma redução significativa (p<0,001) de 4,5 e 4,42 log10 para CaS e CaR, respectivamente. Para CaS, os valores de Concentrações Inibitórias Mínimas (CIMs) de fluconazol, curcumina e verapamil foram de 0,5 μg/mL, 20 μM (7,37 μg/mL) e 4 mg/mL (4.000 μg/mL), respectivamente; as quais promoveram reduções ≥ 1,4 log10 nas concentrações ≥ CIM (p≤0,045). Para CaR, fluconazol e verapamil apresentaram valores de CIM de 128 μg/mL e 4 mg/mL (4.000 μg/mL), respectivamente; a curcumina não reduziu a viabilidade de CaR, ao passo que redução significativa ≥ 1,74 log10 foram observadas para verapamil e fluconazol ≥ CIM (p<0,001). A associação sub-CIM de verapamil + fluconazol de 2 mg/mL (2.000 μg/mL) + 0,25 μg/mL, respectivamente, para CaS e 2 mg/mL (2.000 μg/mL) + 64 μg/mL, respectivamente, para CaR mostrou uma redução (p<0,001) maior para CaR de 4,08 log10 em comparação com CaS (p<0,001, 0,59 log10). A associação de curcumina + fluconazol de 10 μM (2,68 μg/mL) + 0,25 μg/mL, respectivamente, para CaS e 40 μM (14,73 μg/mL) + 64 μg/mL, respectivamente, para CaR promoveu redução maior para CaR (p<0,001) de 2,28 log10 do que para CaS (p<0,001) de 1,58 log10. A associação de curcumina, verapamil e fluconazol nessas mesmas concentrações resultou em uma redução (p<0,001) de 0,77 log10 para CaS e de 2,86 log10 e para CaR. Concluiu-se que a aPDT reduziu tanto a viabilidade de CaS como a de CaR. O verapamil e a curcumina reverteram a resistência de C. albicans ao fluconazol em culturas planctônicas, tendo um efeito inibitório maior para CaR do que para CaS.