Detecção e caracterização molecular de hemoplasmas e Bartonella spp. em pequenos mamíferos, grandes ruminantes e ectoparasitas associados

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Gonçalves, Luiz Ricardo [UNESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: eng
• Instituição de defesa: Universidade Estadual Paulista (Unesp)
• Palavras-chave em Português: Bartonella; Hemoplasmas; Diversidade genética; Pequenos mamíferos; Grandes ruminantes
• Link de acesso: http://hdl.handle.net/11449/194197

Hemoplasmas e Bartonella spp. compreendem dois importantes grupos bacterianos amplamente distribuídos e que infectam animais e humanos. Hemoplasmas são bactérias epicelulares, não cultiváveis, sem parede celular, e que se ligam à superfície dos glóbulos vermelhos de mamíferos. Por outro lado, Bartonella spp. são bactérias Gram-negativas que infectam principalmente eritrócitos e células endoteliais de várias espécies de mamíferos. Com o objetivo de avaliar a ocorrência e a diversidade genética desses grupos bacterianos, pequenos mamíferos e seus ectoparasitos foram amostrados em Campo Grande, Mato Grosso do Sul (MS) e Três Barras, Santa Catarina (SC), Brasil. Além disso, ruminantes e ectoparasitas associados foram amostrados em Campo Grande, MS, e Passos, Minas Gerais (MG), Brasil. Por fim, amostras de sangue de búfalos selvagens submetidos a um processo de translocação entre dois locais em Moçambique, África, também foram analisadas. Ensaios de PCR convencional, em tempo real quantitativo com sonda de hidrólise e com intercalante de DNA seguido de dissociação em alta resolução, análises filogenéticas – Máxima verossimilhança, Neighbor-joining e Inferência Bayesiana – e de bioinformática – Neighbor-Net e Templeton Crandall e Sing (TSC) network, foram utilizados para avaliar a ocorrência e diversidade genética de espécies de hemoplasmas e Bartonella spp. O presente estudo mostrou que 31,4% (33/105) dos pequenos mamíferos (sete [50%] capivaras; 14 [32,5%] gambás; 12 [30,7%] ratos) e 4,3% (5/116) dos ectoparasitas (três [2,6%] Amblyomma spp.; dois [1,7%] Polypax spinulosa) amostrados em Campo Grande foram positivos para hemoplasmas baseado no gene 16S rRNA. As análises filogenéticas e de distância mostraram que os hemoplasmas identificados parecem ser espécie-específicos. Em contraste, nenhum dos roedores e marsupiais, assim como seus ectoparasitas, mostraram-se positivos para Bartonella sp. nos ensaios moleculares e/ou na cultura. Por outro lado, ensaios moleculares dirigidos para os genes nuoG e 16S e para região ITS mostraram a presença de DNA de Bartonella coopersplainsensis em dois (3,6%) dos 55 Rattus rattus amostrados em Três Barras, SC. Este é o primeiro relato de B. coopersplainsensis na América do Sul. Além disso, DNA de Bartonella bovis foi encontrado em 21 das 75 (28%) amostras de sangue de bovinos e em 13 dos 126 (10,3%) carrapatos (Rhipicephalus microplus) coletados em Campo Grande. Da mesma forma, um (1%) dos 101 búfalos e quatro (4,2%) das 95 amostras de piolhos (Haematopinus tuberculatus) obtidas em Passos, MG, foram positivas para Bartonella spp. Enquanto o DNA de B. bovis foi identificado em uma amostra de sangue de búfalo, o DNA da espécie de Bartonella sp. amplificado nos piolhos foi geneticamente relacionado à Bartonella sp. previamente detectada em Haematopinus quadripertusus em Israel. Em contraste com as sequências idênticas detectadas nos piolhos, vários genótipos de B. bovis foram identificados dentre as amostras de sangue de bovinos. Por fim, entre os 97 búfalos africanos, DNA de Bartonella spp. e hemoplasmas foi detectado em 4,1% e 15,4% dos animais, respectivamente. A análise pelo BLAST mostrou a ocorrência de três agentes associados a bovinos: Bartonella bovis, Mycoplasma wenyonii e 'Candidatus M. haemobos'. Tais achados contribuem para o entendimento sobre a distribuição e diversidade genética de hemoplasmas e Bartonella spp. que circulam em roedores, gambás, bovinos, búfalos e ectoparasitos no Brasil e Moçambique.