Identificação de microrganismos com potencial probiótico a partir do leite e colostro humanos

Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: 2020
Autor(a) principal: Netzel, Vinícius Augusto lattes
Orientador(a): Pincerati, Márcia lattes
Banca de defesa: Não Informado pela instituição
Tipo de documento: Dissertação
Tipo de acesso: Acesso aberto
Idioma: por
Instituição de defesa: Universidade Positivo
Programa de Pós-Graduação: Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia Industrial
Departamento: Pós-Graduação
País: Brasil
Palavras-chave em Português:
Área do conhecimento CNPq:
Link de acesso: https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/2291
Resumo: Quando existe um desequilíbrio da microbiota intestinal, a suplementação com probióticos pode fornecer uma alternativa terapêutica para doenças associadas com esse desbalanço. Os microrganismos considerados probióticos podem ser isolados de diversas fontes, sendo o colostro e leite humano potenciais fontes para identificação destes microrganismos. A presente dissertação aborda estes temas em dois capítulos. O capítulo 1 apresenta uma revisão de literatura que investiga os principais gêneros e espécies com potencial probiótico presentes no colostro e leite humanos e a aplicação de cepas bacterianas no que se refere ao potencial probiótico que oferecem. O capítulo 2 apresenta um artigo experimental que tem por objetivo avaliar a diversidade microbiana no leite e colostro em relação a frequência de abundância de possíveis gêneros probióticos e isolar cepas candidatas a probióticos. Para isso, para cada voluntária, cerca de 2 mL de amostras de colostro e leite materno foram coletadas. Foram obtidas, no total, 7 amostras de colostro e 10 amostras de leite humano. A identificação da diversidade microbiana das amostras foi realizada por meio de sequenciamento de nova geração do pool das amostras coletadas para colostro e leite materno, separadamente. O isolamento das cepas de microrganismos das amostras coletadas foi realizado em placas de Petri contendo meio MRS suplementado com L-cisteína, incubadas a 37 °C sob condições anaeróbicas durante 48 horas ou mais. Após a incubação, as colônias isoladas tiveram o DNA extraído para posterior amplificação do gene 16S rRNA por meio de PCR (Polymerase Chain Reaction) e sequenciamento. As sequências obtidas foram comparadas com o banco internacional NCBI (Nacional Center for Biotechnology Information) através da ferramenta BLAST (Basic Local Alignment Search Tool) para a identificação molecular dos microrganismos isolados. Foram identificados os seguintes microrganismos: Staphylococcus epidermidis, Candida parapsilosis, Propionibacterium acnes, Enterococcus faecalis e Streptococcus salivarius, das quais as duas últimas possuem potenciais efeitos probióticos. O sequenciamento de nova geração apontou a presença de uma diversidade microbiana maior presente do pool de leite materno em relação ao de colostro, tanto a nível de filo como de gênero. No pool de de colostro o filo Firmicutes representou mais de 90 % do pool total, já no leite materno houve uma distribuição dos filos Cyanobacteria, Firmicutes e Proteobactéria. Streptococcus foi o gênero mais abundante seguido por Staphylococcus em ambos os pools, Lactobacillus e Bifidobacterium foram encontrados em baixa abundância tal que não permitiu o seu isolamento. Dessa forma, conclui-se na presente dissertação que o leite materno é o mais indicado para o isolamento de microrganismos devido a sua maior diversidade microbiana e o isolamento de possíveis cepas probióticas, entretanto alguns gêneros específicos que são mais conhecidos pelas suas propriedades probióticas como: Lactobacillus, Bifidobacterium, Lactococcus e Pediococcus não puderam ser isolados visto a sua baixa frequência em ambas as amostras. Entretanto, microganismos pertencentes a outros gêneros que foram isolados do leite materno mostraram ser possíveis candidatos a propriedades probióticas que poderão ser utilizados futuramente com o propósito de fazer parte de um suplemento alimentar, após realizada a caracterização destas cepas.