Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2020 |
Autor(a) principal: |
Gutierrez, Gabriela Mancia de
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Orientador(a): |
Santos, Maria Teresa Botti Rodrigues
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Banca de defesa: |
Santos, Maria Teresa Botti Rodrigues
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Ortega, Adriana de Oliveira Lira
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Douek, Débora Heller
,
Amado, Pamela Pontes Penas
,
Alves, Levy Anderson Cesar |
Tipo de documento: |
Tese
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Cruzeiro do Sul
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós Graduação em Odontologia
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: |
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Área do conhecimento CNPq: |
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Link de acesso: |
https://repositorio.cruzeirodosul.edu.br/handle/123456789/919
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Resumo: |
Esse estudo teve como objetivo analisar as diferenças no perfil de proteínas e avaliar o perfil da proteólise da histatina (his) 1 e 5 da saliva total de adolescentes com paralisia cerebral (PC) e gengivite comparados a saudáveis com e sem gengivite, utilizando espectrometria de massas. Foram selecionados 24 indivíduos, os quais foram divididos em 3 grupos: G1 - PC com gengivite, G2 - sem PC e sem gengivite, G3 - sem PC e com gengivite. Foram coletados o índice gengival (IG) e índice de higiene oral simplificado (IHO-S), além da saliva total não estimulada. Foram realizados um pool para cada grupo e os peptídeos provenientes da digestão das proteínas salivares foram submetidos a cromatografia líquida seguida de ionização por electrospray e espectrometria de massas em tandem (LC-ESI-MS/MS) e as proteínas foram identificadas usando o banco de dados de humanos Uniprot. A degradação proteica foi realizada pela adição de his 1 e his 5 sintéticas ao sobrenadante da saliva total diluído (1:10) e incubação a 37ºC pelos tempos 0, 0,5, 1,5, 4, 6, 8, 24 e 48 horas. Em seguida, foram realizadas as análises de eletroforese em gel de poliacrilamida catiônica (PAGE) e mensuração da densidade das bandas (DB) (%) das imagens obtidas. A análise dos dados referentes à DB durante diferentes períodos de tempos das médias dos índivíduos de cada grupo e entre os parâmetros da saúde gengival foi realizada com One-way ANOVA ou teste de Kruskal-Wallis. Para avaliação dos fatores que influenciam a porcentagem de DB da degradação das histatinas foi realizada análise de Regressão de Poisson Multinível (considerando o nível do Sujeito) (α=5%). Os grupos não apresentaram diferença significativa no fluxo salivar, mas houve diferença nos índices gengivais para os grupos que possuíam gengivite (P < 0,001). Foram identificadas 487 proteínas; 183 proteínas do pool 1, 288 do pool 2 e 189 do pool 3. Das proteínas exclusivas, 115 foram do pool 1, 214 do pool 2 e 72 do pool 3. Em comum entre os pools 1 e 3 foram 14 proteínas. Por meio da análise de regressão de Poisson o Sujeito ter PC e gengivite influencia na degradação da his 1 e his 5 (P < 0,001), a idade do Sujeito influencia na degradação da his 5, quanto mais velho maior degradação (P < 0,001) e que o IG influencia na degradação da his 1 (P < 0,001). Pode-se concluir que a his 1 é mais resistente à proteólise do que a his 5, a degradação das his 1 e his 5 ocorre mais rapidamente em indivíduos com PC e gengivite. A haptoglobin e toll-like receptor 9 foram encontradas exclusivamentes no pool 1 e possuem as 3 três funções imunológicas: resposta imune, atividade antimicrobiana e resposta inflamatória. Essa abordagem fornece uma nova visão sobre o perfil proteômico da saliva durante a inflamação gengival e, algumas proteínas encontradas exclusivamente na saliva de indivíduos com PC e gengivite (pool 1) foram previamente apontadas como potenciais biomarcadores para periodontites, indicando que indivíduos com PC podem apresentar maior risco para a progressão da periodontite. |