Marcadores moleculares para identificação de carrapatos vetores de agentes rickettsiais

• Ano de defesa: 2008
• Autor(a) principal: Agostini, Marlos da Matta
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa; BR; Bioquímica e Biologia molecular de plantas; Bioquímica e Biologia molecular animal; Mestrado em Bioquímica Agrícola; UFV
• Palavras-chave em Português: Marcadores moleculares; Carrapatos; ITS2; Molecular markers; Ticks; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULAR
• Link de acesso: http://locus.ufv.br/handle/123456789/2447

A importância parasitológica dos carrapatos reside não somente na sua ação espoliativa sobre o hospedeiro, como também na grande capacidade de atuar como vetores de agentes patogênicos, entre os quais se incluem vírus, bactérias, protozoários e nematóides. Tradicionalmente, a identificação de carrapatos baseada em características morfológicas é uma atividade extremamente trabalhosa, demorada, passível de dúvidas, dependente de pessoal especializado e com limitação quanto à sua possibilidade de realização, dependendo do estado de conservação e do estágio de desenvolvimento do espécime. Assim, o presente trabalho é pioneiro no Brasil, no sentido de adotar uma estratégia molecular para a identificação de carrapatos. Os objetivos foram buscar marcadores moleculares capazes de identificar e distinguir diferentes gêneros e espécies de carrapatos, envolvendo amplificação dos espaçadores internos transcritos secundários (ITS2) e seqüenciamento dos mesmos. Além disso, objetivou-se o desenho de primers específicos e a padronização de PCRs direcionadas às espécies de maior importância epidemiológica. Foi observado que os ITS2 são regiões úteis para a identificação molecular por apresentarem baixa variabilidade intraespecífica. Três dos quatro conjuntos de primers desenhados para gêneros demonstraram ser eficientes para identificação, enquanto que nos ensaios para primers espécie-específicos foi obtido êxito para três espécies do gênero Amblyomma, resultando em amplicons de 404 pb, 389 pb e 320 pb característicos para as espécies A. cajennense, A. oblongoguttatum e A. parvum, respectivamente. Estes resultados contribuem para a identificação molecular de carrapatos, já que, de forma inédita, foram caracterizadas seqüências gênicas que permitem identificar e/ou diferenciar carrapatos de grande importância nacional.