Indução in vitro de haplóides e de poliplóides e detecção molecular de alelos da auto- incompatibilidade em maracujazeiro (Passiflora edulis f. flavicarpa Deg.)

• Ano de defesa: 2001
• Autor(a) principal: Rêgo, Mailson Monteiro do
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa
• Palavras-chave em Português: Haploids; Embryogenesis; Polyploids; Ciências Agrárias
• Link de acesso: http://www.locus.ufv.br/handle/123456789/10274

Os objetivos deste trabalho foram avaliar a resposta ginogênica em 11 genótipos, adequar metodologia para indução in vitro de poliplóides e detectar alelos da auto - incompatibilidade em maracujazeiro azedo ( Passiflora edulis f. flavicarpa Degener). Para avaliar os 11 genótipos, óvulos não -fertilizados foram inoculados em meio MS suplementado com as vitaminas do meio B5, 100 mg.L -1 de mio-inositol, 3% de sacarose, 5,0 mg.L -1 de 2,4 – D e 1,0 mg.L -1 de BAP e cultivado na ausência d e luz a 27°C ± 1. Na indução dos poliplóides, utilizou -se explantes de segmentos de hipocótilo (1,0 cm de comprimento) de plantas germinadas in vitro e o meio MS suplementado com agentes antimitóticos, colchicina (0, 25, 250 e 1250 μM) e orizalina (0, 5, 15 e 30 μM). A determinação do nível ploidia das plantas regeneradas e aclimatadas foi feita por meio da contagem do número de cromossomos em células metafásicas de ponta de raiz. Na detecção molecular dos alelos S da auto -incompatibilidade, reações de PCR foram conduzidas utilizando DNA genômico extraído de folhas jovens e oligonucleotídeos iniciadores específicos para os alelos-S das classes I e II. O genótipo II – 20 apresentou melhor resposta ginogênica, produzindo 21 embriões (7,0 7% dos óvulos inoculados). Na indução dos poliplóides, os meios mais adequados foram MS suplementado com colchicina a 25 μM e MS suplementado orizalina a 15 μM. A colchicina, em concentrações superiores (250 e 1250 μM) foi fitotóxica aos explantes. Os indivíduos diplóides apresentaram 2n = 2x = 18 cromossomas, enquanto os tetraplóides, 2n = 4x = 36. O número de cloroplastos por célula guarda foi eficiente indicador do nível de ploidia nesta espécie. Plantas diplóides possuem quatro cloroplastos por célula-guarda e as tetraplóides oito, em média. Utilizando- se os iniciadores específicos para os alelos -S, foi possível detectar e incluir a nível molecular, os alelos S 1 e S 3 do maracujazeiro, no subgrupo I das glicoproteínas do loco -S (SLG) das brassicas.