Efeitos do Thiodan® em fígado e em ovários em maturação avançada de lambaris Astyanax bimaculatus

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: Marcon, Lucas
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de Viçosa; BR; Biotecnologia, diagnóstico e controle de doenças; Epidemiologia e controle de qualidade de prod. de; Doutorado em Medicina Veterinária; UFV
• Palavras-chave em Português: Pesticidas; Peixe; Reprodução; Pesticides; Fish; Playback; CNPQ::CIENCIAS AGRARIAS::RECURSOS PESQUEIROS E ENGENHARIA DE PESCA::RECURSOS PESQUEIROS DE AGUAS INTERIORES
• Link de acesso: http://locus.ufv.br/handle/123456789/1470

O agrotóxico Thiodan® (350g/L de endosulfan) é um inseticida organoclorado utilizado em diversas monoculturas que pode chegar aos ecossistemas aquáticos e afetar a reprodução e a integridade das populações de peixes. O fígado é um dos principais órgãos para a biotransformação de diversos xenobióticos. Quando os peixes são expostos a uma concentração elevada de agentes químicos podem ocorrer danos hepáticos. Os ovários de peixes apresentam folículos em diferentes estádios de desenvolvimento que são envoltos por zona radiata, células foliculares, membrana basal e células da teca, formando o complexo folicular. Agentes estressores podem causar aumento ou diminuição do diâmetro dos folículos vitelogênicos, alterar a quantidade de folículos nos diferentes estádios de desenvolvimento e aumentar a incidência de atresia. Assim, o presente estudo teve por objetivo avaliar os efeitos do Thiodan® sobre o fígado e ovários de lambaris Astyanax bimaculatus por meio de análises morfológica, morfométrica e imunoistoquímica. Os peixes expostos ao tóxico foram divididos em quatro experimentos: 1) sem aclimatação e sem alimentação; 2) sem aclimatação e alimentados; 3) com aclimatação de 10 dias e sem alimentação; 4) com aclimatação de 10 dias e alimentados. Em todos os experimentos foram utilizadas três concentrações diferentes do Thiodan® inferiores à CL50 de 13,67&#956;g/L pré-determinada em laboratório de acordo com a NBR 15088 (ABNT, 2007). As concentrações utilizadas em cada experimento foram de 1,15; 2,3 e 5,6&#956;g/L, além de um grupo controle livre de tóxico, com três repetições contento 10 peixes para cada concentração. Após as 96h, seis peixes de cada grupo foram capturados e anestesiados com benzocaína (1:10.000), de acordo com as Normas da Comissão de Ética do Departamento de Veterinária/UFV (protocolo 24/2009). Os fígados e ovários foram coletados e processados por técnicas histológicas rotineiras. As lâminas foram analisadas em microscópio de luz Olympus CX31. Foram obtidas imagens digitais de 10 campos aleatórios por animal em objetiva de 20X e 40X para avaliação histológica. As características da água utilizada nos testes em sistema estático foram mantidas de acordo com as recomendações da NBR 15088 (ABNT, 2007). A análise histológica dos fígados mostrou, no experimento 1 (sem aclimatação/sem alimentação), na concentração de 5,6&#956;g/L de Thiodan®, a menor intensidade (0,10±0,0) da reação ao PAS no citoplasma dos hepatócitos quando comparada ao grupo controle (1,33±0,51). No entanto, houve diferença (P<0,05) nesse mesmo experimento quando comparado com as concentrações 1,15&#956;g/L (2,66±0,81) e 2,3&#956;g/L (3,00±0,0) caracterizando depleção de glicogênio. Além disso, houve alterações do diâmetro de núcleos e citoplasma dos hepatócitos nos diferentes experimentos, e maior quantidade de núcleos de hepatócitos nos grupos expostos ao Thiodan® associada com a redução na quantidade de citoplasma. O Índice de Alteração Histológica (IAH) dos lambaris coletados manteve-se entre 4,33 a 8,33 (para os grupos controles); 18,50 a 28,83 (para as concentrações de 1,15&#956;g/L); 20,33 a 28,33 (para as concentrações de 2,3&#956;g/L) e 23,66 a 27,66 (para as concentrações de 5,6&#956;g/L). Os lambaris coletados nos diferentes experimentos apresentaram valores de IAH para os grupos controle inferiores (P<0,05) aos grupos expostos. Estes resultados demonstraram que o Thiodan® pode estar influenciando as funções hepáticas pela maior mobilização das reservas de glicogênio na concentração 5,6&#956;g/L. As alterações observadas nos fígados dos lambaris não foram severas, sendo alterações de estádio I e II, indicando dano reparável do tecido hepático nos diferentes grupos e experimentos. Nos ovários, percebeu-se que a ação do Thiodan® em níveis subletais não afetou a morfologia dos diferentes estádios de desenvolvimento folicular. Porém, os experimentos com aclimatação demonstraram alterações nas quantidades de folículos primários e secundários quando comparados com os peixes dos experimentos sem aclimatação. Além disso, houve aumento do número de folículos atrésicos e diâmetro dos folículos secundários nos grupos expostos ao Thiodan® nos diferentes experimentos. Estes resultados sugerem mecanismos compensatórios da perda reprodutiva quando em meio com condições desfavoráveis. As análises imunoistoquímicas demonstraram marcação crescente e uniforme ao longo do desenvolvimento folicular para integrina &#946;1 e colágeno tipo IV. Entretanto, a caspase 3 foi observada somente no complexo folicular de folículos secundários, mesmo quando os peixes são expostos a diferentes concentrações de Thiodan®, o que confirma a integridade das células foliculares e da via apoptótica caspase-3-dependente, a qual pode estar sendo ativada para futuros processos de regressão folicular.