Ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis: estudos in vitro e in silico.

• Ano de defesa: 2022
• Autor(a) principal: Dias, Natália Aparecida Vasconcelos [UNIFESP]
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Paracoccidioides brasiliensis; Ciclofilinas; Calcineurina; Alisporivir
• Link de acesso: https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/66143

Objetivo: O objetivo principal deste trabalho foi elucidar as possíveis funções das ciclofilinas na biologia do Paracoccidioides brasiliensis através de experimentos in vitro e in silico. Métodos: Os métodos in vitro foram realizados em três experimentos em duplicata de culturas de células de leveduras de P. brasiliensis com três grupos (CTR, CsA e Debio) a 37°C. Foram realizados experimentos de Perfil de crescimento celular utilizando a densidade óptica ao longo dos dias de cultura, experimentos de análise de estabilidade farmacológica e coloração dos corpúsculos lipídicos. Os experimentos de transição morfológica também seguiram os grupos descritos acima, porém a temperatura de cultura foi de 25°C para 37°C após a divisão dos grupos de estudo. Foram realizadas análises das fases de transição morfológica e também a coloração com oil red O. O trabalho com análise de bancos de dados abertos foi realizada utilizando a ferramenta blastx, blastp do NCBI e a ferramenta Align do site uniprot.org. Resultados: As leveduras tratadas com CsA apresentaram crescimento significativamente inferior que o grupo CTR, enquanto o grupo Debio apresentou diferença sutil no crescimento quando comparado ao grupo CTR. A estabilidade farmacológica da CsA é alta mesmo em pouco tempo de exposição ao fármaco. A transição M-L foi afetada no grupo tratado com CsA, enquanto o grupo Debio apresentou resultados próximos ao CTR. A busca pelas ciclofilinas do gênero Paracoccidioides encontrou 10 ciclofilinas por isolado/espécie. Conclusão: A inibição da calcineurina e ciclofilinas pela CsA apresenta respostas biológicas mais expressivas ao P. brasiliensis, o que sugere um papel mais relevante da calcineurina no crescimento celular, manutenção dos CL e transição morfológica. Os fungos do gênero Paracoccidioides apresentam dez ciclofilinas homólogas entre si e possuem organização gênica idêntica, porém com regulação da expressão diferente.