Análise proteômica do plasma seminal de homens com obesidade com e sem alteração nos parâmetros espermáticos

• Ano de defesa: 2024
• Autor(a) principal: Carvalho, Renata Cristina de [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Obesidade; Tecido adiposo; Análise do sêmen; Proteínas de plasma seminal
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11600/71890

Objetivo: Comparar a expressão de proteínas seminais entre amostras de homens com obesidade com e sem alterações nos parâmetros espermáticos. Ainda, verificar se as proteínas justificam a alteração espermática e se tal prejuízo também é refletido nos aspectos funcionais do espermatozoide. Métodos: Neste estudo observacional, homens com idade entre 20 e 50 anos foram distribuídos em 3 grupos de acordo com sua porcentagem de gordura corporal e características espermáticas, sendo: grupo controle eutrófico, obesidade sêmen normal e obesidade sêmen alterado. A coleta da amostra seminal aconteceu após 2 a 7 dias de abstinência ejaculatória; com ela realizou-se a análise seminal convencional, que auxiliou na distribuição dos grupos, análise funcional dos espermatozoides (integridade do DNA, atividade mitocondrial e integridade do acrossoma) e, com a alíquota restante, centrifugações foram aplicadas para separação do plasma seminal. Assim, o plasma seminal obtido foi utilizado para avaliação dos níveis proteicos; para tal, quantificamos o total de proteínas, preparamos cada amostra e realizamos a análise proteômica sem alvo definido usando espectrometria de massas (LC-MS/MS). A análise estatística dos dados gerais dos participantes e das variáveis seminais foi realizada pelo software SPSS incluindo avaliação de normalidade, homogeneidade, além de teste General Linear Model (GLM) com post-hoc de Sidak, sempre considerando p menor que 0,05. Por fim, os dados gerados pela proteômica foram utilizados para identificação das proteínas diferencialmente representadas entre os grupos (teste ANOVA com post-hoc LSD realizado pelo software MetaboAnalyst). Resultados: 73 homens participaram do estudo (19 no grupo controle eutrófico, 33 em obesidade sêmen normal e 21 em obesidade sêmen alterado) apresentando uma média de idade de 31,05, 33,88 e 36,67 anos, respectivamente. Conforme esperado, os grupos de obesidade apresentaram maior peso, porcentagem de gordura corporal e IMC em relação ao grupo eutrófico, mas sem diferença entre si. A análise seminal convencional indicou resultados significativos para as variáveis motilidade progressiva, motilidade não progressiva, imóveis, concentração e contagem espermática, morfologia, vitalidade e total de espermatozoides móveis morfologicamente normais (MMN) sendo que os piores valores foram observados sempre no grupo obesidade sêmen alterado com exceção da variável motilidade não progressiva na qual os resultados significativos foram entre os grupos de eutróficos e obesidade sêmen normal (este último apresentando menor porcentagem de espermatozoides com motilidade não progressiva). Em relação aos aspectos funcionais dos espermatozoides, o grupo obesidade sêmen alterado apresentou maior porcentagem de espermatozoides com DNA totalmente fragmentado e maior prejuízo na atividade mitocondrial espermática; já a integridade do acrossoma foi pior para os grupos de obesidade em relação aos homens eutróficos. Por fim, na análise proteômica foram encontradas 746 proteínas sendo que 30 delas se mostraram diferencialmente representadas entre os grupos; no grupo obesidade sêmen alterado verificamos que 3 proteínas estavam praticamente ausentes (Kunitz-type protease inhibitor 3, Ovochymase-2, Dipeptidase 3). Além disso, as outras proteínas apresentaram resultados significativos variados entre os grupos sempre com menor concentração nos grupos de obesidade e ainda menor no grupo de obesidade sêmen alterado. Conclusões: Homens com obesidade e alteração nas características espermáticas podem apresentar também maior prejuízo nos aspectos funcionais dos seus gametas e nas vias moleculares seminais.