Papel da Interleucina-9 na imunopatologia da infecção experimental por Trypanosoma cruzi

• Ano de defesa: 2021
• Autor(a) principal: Silva, Nadjania Saraiva de Lira [UNIFESP]
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal de São Paulo
• Palavras-chave em Português: Trypanosoma cruzi; IL9; Fibrose; Colágeno
• Link de acesso: https://hdl.handle.net/11600/62209

A doença de Chagas é uma parasitose causada pelo protozoário T. cruzi e afeta cerca de 8 milhões de pessoas no mundo. O balanço de citocinas pró e anti inflamatórias produzidas durante a resposta imunológica contribui para a definição do curso da doença. A persistência do parasita em determinados tecidos provoca estímulo inflamatório crônico, desequilíbrio do estresse oxidativo celular que pode ocasionar dano tecidual e fibrose. Pacientes com cardiopatia chagásica crônica apresentaram elevação nos níveis de IL9, importante citocina que atua na regulação da ativação e maturação de mastócitos e de processos inflamatórios lesivos e fibrogênicos. Apesar de dados escassos e controversos sobre o papel da IL9 em outras patologias, pouco se conhece sobre essa interleucina na doença de Chagas. Portanto, este trabalho tem o intuito de avaliar o papel da IL9 no curso da infecção por T. cruzi in vitro e in vivo. In vitro foi observado que o pré-tratamento com a IL9 recombinante (rIL9) reduz a porcentagem de mioblastos e macrófagos derivados de medula óssea infectados e o número de parasitas internalizados após 3h de invasão, e esse efeito foi revertido ao neutralizar a ação da IL9 com o anticorpo 9CI. Tratamento após a invasão (pós-tratamento) com rIL9 em mioblastos também reduz a multiplicação dos parasitas e o número de parasitas liberados no meio extracelular após 96 horas pós infecção (hpi). Adicionalmente, a neutralização com 9CI bloqueia esse efeito em ambos tipos celulares, e até aumenta a multiplicação dos parasitas em mioblastos em 96hpi. O pós-tratamento de mioblastos infectados com rIL9 aumenta a produção de NO em 72hpi e a adição de L-NMMA (inibidor de NO sintase) resulta no retorno da multiplicação do parasita similar aos controles. Nenhuma diferença foi observada na síntese de citocinas anti e pró-inflamatória nos mioblastos infectados e pós-tratados com rIL9 após 72hpi. Nos macrófagos infectados e tratados com rIL9 não houve diferença na síntese de NO, mas o pós-tratamento com rIL9 aumentou a síntese de IL6 e reduziu a produção de TGF-beta. In vivo, detectamos significativo aumento de células Th9 e Tc9 nos esplenócitos de camundongos Balb/c infectados com tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi na fase crônica da infecção, acompanhado da elevação na síntese de IL9 por estas células. Ademais, aumento significativo nos níveis de IL9 foi encontrado no lisado de coração desses animais em fase crônica em comparação com seu controle não infectado. Quando os animais infectados foram tratados com anticorpo neutralizante (9CI) ou rIL9 durante a fase aguda (15dpi), não observamos nenhuma diferença na carga parasitária no coração em nenhum dos grupos avaliados. Contudo, a neutralização de IL9 aumentou a área de fibrose cardíaca, com o aumento da deposição de colágenos I e III na matriz extracelular do coração, e elevou a síntese de IFN-γ, TNF-α e IL6 no lisado de coração durante a fase crônica da infecção. Já o tratamento com rIL9 reduziu a área de fibrose cardíaca e a síntese de TNF-α e IL12 no coração. Esses dados demonstram que a IL9 interage de modo célula-específica com os mioblastos e os macrófagos contribuindo na resposta celular contra a infecção de T. cruzi, entretanto por diferentes mecanismos. In vivo, a IL9 demonstra ser uma importante interleucina que participa na resposta inflamatória do hospedeiro durante a fase crônica da infecção experimental com essa cepa, sendo importante para o desenvolvimento da resposta anti-fibrótica.