Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2020 |
Autor(a) principal: |
Abreu, Ana Paula Martinez de
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Orientador(a): |
Massard, Carlos Luiz
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Banca de defesa: |
Massard, Carlos Luiz
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Guedes Junior, Daniel da Silva
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Roier, Erica Cristina Rocha
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Baêta, Bruna de Azevedo
,
Ubiali, Daniel Guimarães
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Tipo de documento: |
Tese
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias
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Departamento: |
Instituto de Veterinária
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: |
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Palavras-chave em Inglês: |
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Área do conhecimento CNPq: |
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Link de acesso: |
https://rima.ufrrj.br/jspui/handle/20.500.14407/9605
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Resumo: |
Este estudo teve como objetivos realizar a caracterização molecular de Trypanosoma vivax e Trypanosoma theileri através dos genes 18S e catl, bem como analisar o perfíl bioquímico relacionado à infecção para Trypanosoma vivax em bovinos do estado do Rio de Janeiro. As amostras foram coletadas, por meio de venopunção da veia coccígea de 389 bovinos, sendo o sangue total coletado acondicionado em tubos contendo ácido etileno-amino-tetracético à 10% para análise molecular e tubos sem anticoagulante para bioquímica, sendo posteriormente enviadas ao Laboratório de Hemoparasitos e Vetores da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro onde foram realizadas as análises. As amostras de DNA foram extraídas seguindo-se protocolo recomendado pelo fabricante (Promega®) e posteriormente armazenadas em freezer -20 °C até o momento das análises moleculares. O soro para análise bioquímica foi obtido pela centrifugação em centrífuga clínica à 3.000 rpm por 5 minutos e posteriormente foi enviado ao Laboratório de Análises Clínicas do Laboratório de Quimioterapia Experimental em Parasitologia Veterinária (LQEPV/ UFRRJ), onde os níveis séricos de Gama Glutamiltransferase (GGT), Proteína Sérica Total (PTS), Albumina (ALB), Bilirrubina Total (BT) e Direta (BD), Creatinina (CR), Uréia (UR), Fosfatase Alcalina (FAL), Lactato Desidrogenase (LDH), Aspartato Aminotransferase (AST/TGO) e Alanina Aminotransferase (ALT/TGP) foram determinados usando o analisador bioquímico automatizado A15 (Biosystems®) e kits de reagentes comerciais de acordo com o equipamento utilizado. A análise molecular foi realizada através dos genes 18S para identificação de Trypanosoma sp, e catl-like (Cathepsina L-like) para identificação Trypanosoma vivax e T. theileri. Após análise de frequência, algumas amostras de cada município foram selecionadas para análise filogenética e comparação da identidade das sequências do presente estudo com outras sequências encontradas no GenBank. Dentre as amostras analisadas 4,6% (18/389) apresentaram-se positivas para Trypanosoma vivax em esfregaço sanguíneo, não sendo visualizadas amostras positivas para Trypanosoma theileri. Para o gene 18S, 15,4% (60/389) foram positivas para Trypanosomasp, já para o gene catl, 12,8% (50/389) foram positivos para T. vivax enquanto para T. theileri houve 3,6% (14/389) de animais positivos. A análise filogenética para T. vivax mostrou 2 clusters definidos para o gene 18S rDNA e 4 para o gene catl, já para T. theileri, observamos 1clusters definidos para o gene 18S rDNA e 4 para o gene catl, com 15 genótipos distintos. O presente estudo teve por finalidade relatar a primeira caracterização molecular de T. vivax e T. theileri no estado do Rio de Janeiro, bem como o primeiro relato da linhagem IB e IF de T. theileri baseado no gene catl. Além disso, este também foi o primeiro relato de análise bioquímica dos animais infectados naturalmente por Trypanosoma vivax no estado do Rio de Janeiro, onde foi possível verificar que a LDH foi a única análise significativamente alterada representando aproximadamente sete vezes mais chance dos bovinos serem positivos para T. vivax quando esta enzima está aumentada |