| Resumo: |
Os estudos de desreplicação começaram a ser realizados com o objetivo de evitar o re-isolamento de compostos já conhecidos, no entanto, tornou-se uma ferramenta bastante útil para análise do perfil químico de uma espécie de interesse. A Harpalyce brasiliana Benth (Leguminosae) é uma planta endêmica do bioma da Caatinga, popularmente conhecida como “raiz-de-cobra”, devido ao uso do seu extrato hidro-etanólico na medicina popular para tratamento de picadas de serpentes e outras desordens inflamatórias. Estudos já realizados com a espécie possibilitaram o isolamento e a caracterização de diversos flavonoides, bem como estudos farmacológicos apontaram o potencial antiofídico para alguns desses compostos, a exemplo das Cabenegrinas A-I (I) e A-II (II). A produção exacerbada de espécies reativas de oxigênio no organismo promove um desequilíbrio entre a quantidade de agentes oxidantes e o poder de remoção dessas espécies no sistema biológico, gerando o que se denomina estresse oxidativo. Diversas doenças inflamatórias estão associadas à superprodução dessas espécies. Ante o exposto, este trabalho teve como objetivo realizar um estudo de desreplicação do extrato hidro-etanólico bruto das raízes de H. brasiliana e avaliação do potencial anti-inflamatório e antioxidante. O estudo de desreplicação realizado por meio das técnicas hifenadas de Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência acoplada a Espectrometria de Massas (UPLC-MS/MS) com o extrato hidro-etanólico da espécie possibilitou a anotação de 20 compostos, averiguados através de suas massas moleculares, padrões de fragmentação, tempos de retenção e principalmente, por meio da comparação de dados relatados na literatura, sendo em sua maioria, isoflavonas e flavanonas preniladas e geraniladas. O extrato também foi investigado quanto a sua biocompatibilidade, bem como seus efeitos antioxidantes e anti-inflamatórios. Em cultura de células, o extrato demonstrou ser seguro em linhagens de células normais (RAW 247.6 e 3T3) nas concentrações de 31-2000 μg/mL. A atividade antioxidante do extrato (125-2000 μg/mL) foi investigada através dos ensaios de redução do DPPH, capacidade antioxidante total, poder redutor, eliminação do radical hidroxil e quelação de ferro e cobre. Em todos os testes de antioxidantes in vitro, o extrato demonstrou efeitos promissores. Para a dosagem de NO (óxido nítrico) em cultura de células (RAW 247.6), o extrato (500 e 2000 μg/mL) evidenciou redução da expressão de NO. No modelo de bolsa de ar induzido por zimosam, os camundongos receberam zimosam (1 mg/mL) por via subcutânea e posteriormente foram tratados (100, 200 e 400 mg/kg) por gavagem. Neste modelo animal foi observado o efeito anti-inflamatório através da redução do número de leucócitos (especialmente de polimorfonucleares), produção de mieloperoxidase, proteínas totais e níveis de citocinas, bem como, demonstrou o efeito antioxidante através da diminuição do malonaldeído e aumento dos parâmetros de glutationa. Essa abordagem demonstra pela primeira vez que o extrato hidro-etanólico das raízes de H. brasiliana é biocompatível, possui propriedades antioxidantes e anti-inflamatórias em análises pré-clínicas, corroborando seu uso na medicina popular. Tais dados chamam a atenção para a espécie como uma fonte promissora de moléculas bioativas que podem ser utilizadas no tratamento de doenças inflamatórias, podendo contribuir para o avanço das aplicações biofarmacêuticas para esta espécie. |
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