Ação imunomodulatória da cloroquina em células mononucleares do sangue periférico de pacientes com diabetes mellitus tipo 1

• Ano de defesa: 2020
• Autor(a) principal: Almeida Júnior, Renato Ferreira de
• Orientador(a): Rezende, Adriana Augusto de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal do Rio Grande do Norte
• Programa de Pós-Graduação: PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM CIÊNCIAS DA SAÚDE
• País: Brasil
• Palavras-chave em Português: Cloroquina; Diabetes; Imunidade; Nanopartículas; Células mononucleares do sangue periférico
• Link de acesso: https://repositorio.ufrn.br/handle/123456789/31492

O Diabetes mellitus tipo 1 (DM1) é uma doença autoimune, caracterizada por hiperglicemia crônica, a qual gera um processo inflamatório que resulta em complicações micro e macrovasculares. O tratamento do DM1 é direcionado para o controle glicêmico através do uso da insulina, entretanto, não tem sido suficiente para controlar ou reduzir o processo inflamatório. Neste sentido, tem surgido terapias adjuvantes associando anti-inflamatórios e nanopartículas (NPs) como estratégia de prevenir e/ou retardar as complicações associadas a esta doença. A Cloroquina (CQ), por possui propriedades anti-inflamatórias torna-se uma das alternativas de tratamento adjuvante para o diabetes. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar o uso da cloroquina, incorporada ou não em nanopartículas de ácido polilático (PLA), em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de pacientes com DM1, afim de observar seu efeito imunomodulador sobre as citocinas IL-1β, IL-12, IFN-γ, TNF-α e IL-10. Foram selecionados 25 indivíduos normoglicêmicos e 25 pacientes com DM1, ambos com idades entre 10 e 16 anos. O controle glicêmico foi avaliado através da hemoglobina glicada (HbA1c) e concentração sérica de glicose. A viabilidade das PBMCs do grupo DM1 foi avaliada pelo teste MTT por exposição a CQ e CQ incorporada as nanopartículas (CQ NPs) em concentrações de 200, 100, 50, 25, 10 e 5 µM. A concentração de CQ de 10µM foi escolhida e os PBMC dos pacientes DM1 foram submetidos a três condições de tratamento: não tratado (NT), tratado com cloroquina (CQ) e tratado com cloroquina incorporada em nanopartículas (CQ NPs). As células foram incubadas por um período de 48 horas e em intervalos de 24 horas as expressões de mRNA das citocinas IL1B, IFNG, TNFA, IL12 e IL10 foram determinadas por quantificação relativa em PCR em tempo real. A expressão de IL1B foi reduzida em células tratadas com CQ em até 48h (p <0,001) e em CQ NPs após 24h de tratamento (p <0,05); a expressão dos genes IFNG e IL12 foi significativamente reduzida (p <0,001) nas células tratadas com CQ e CQ NPs às 24 e 48h em comparação com NT; o TNFA apresentou redução significativa somente após 48 horas de tratamento com CQ e CQ NPs (p <0,0001) e a expressão de IL10 apresentou redução significativa apenas por 24 h de tratamento com CQ e CQ NPs (p <0,002). Assim, foi possível demonstrar que a CQ possui atividade anti-inflamatória nas células primárias de pacientes com DM1 o que pode representar uma terapia anti-inflamatória alternativa e adjuvante para prevenir complicações do diabetes. Além disso, as nanopartículas de CQ representam uma inovação promissora, podendo oferecer um veículo seguro para sua ação intracelular e melhor controle em tratamentos prolongados.