Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2022 |
Autor(a) principal: |
LIMA, Rennan Ribeiro Mano de |
Orientador(a): |
FONTES, Adriana |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Dissertação
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Tipo de acesso: |
Acesso embargado |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Pernambuco
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pos Graduacao em Ciencias Biologicas
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: |
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Link de acesso: |
https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/45605
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Resumo: |
Os pontos quânticos (PQs) são nanocristais fluorescentes de semicondutores com propriedades ópticas singulares. Os quelatos de gadolínio [Gd(III)] são utilizados como agentes de contraste (ACs) na técnica de imagem por ressonância nuclear magnética (IRM). Combinando-se PQs a quelatos de Gd(III) é possível aliar a especificidade e a sensibilidade dos métodos baseados em fluorescência e proporcionar um sinal paramagnético otimizado para IRM. Assim, o objetivo dessa dissertação foi desenvolver uma nanoplataforma multimodal formada por PQs de CdTe carboxilados, quelatos do tipo DOTA-Gd(III) e a transferrina (Tf), uma vez que receptores de transferrina (RTfs) podem estar superexpressos em células de câncer, sendo alvos interessantes para diferentes estudos sobre a biologia do câncer. Para tanto, os grupos carboxílicos dos PQs foram ativados por agentes de acoplamento para favorecer a conjugação com os ACs de forma covalente, via etilenodiamina. Então, conjugou-se covalentemente o nanossistema obtido com a Tf, utilizando também agentes de acoplamento para propiciar a interação dos grupos carboxílicos dos PQs com aminas da proteína. As nanossondas foram caracterizadas por relaxometria e espectroscopias de absorção e de emissão. A conjugação com a Tf foi analisada por ensaio fluorescente em microplaca (EFM). Para avaliar a efetividade do nanossistema multimodal e sua especificidade por RTfs, ensaios de marcação fluorescente com células HeLa foram também realizados. A nanossonda multimodal exibiu um tempo de relaxação longitudinal (T1) ca. 4,5 menor que o da água e uma relaxividade longitudinal (r1) maior que a do quelato molecular: ca. 2 [por Gd(III)] e 50 [por PQ] (a 37 oC e 60 MHz) e manteve a fluorescência. Observou-se uma efetiva conjugação com a Tf, obtendo-se um sinal de fluorescência relativa de ca. 1.130% pelo EFM. Na citometria de fluxo observou-se uma marcação de ca. 88% das células HeLa, reduzida para ca. 39% após saturação prévia dos RTfs com Tf, sugerindo especificidade para o nanossistema. Uma captação celular eficiente com padrão vesicular foi observada pela microscopia de fluorescência. Portanto, a nanoplataforma multimodal óptica- magnética desenvolvida apresentou potencial para ser aplicada em estudos biológicos associados ao câncer tendo como alvos os RTfs. |