Detalhes bibliográficos
Ano de defesa: |
2019 |
Autor(a) principal: |
ASSIS, Ludmila Arruda de |
Orientador(a): |
MELO NETO, Osvaldo Pompílio de |
Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
Tipo de documento: |
Tese
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Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
Idioma: |
por |
Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Pernambuco
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Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pos Graduacao em Genetica
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Departamento: |
Não Informado pela instituição
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País: |
Brasil
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Palavras-chave em Português: |
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Link de acesso: |
https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/35352
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Resumo: |
A regulação da expressão gênica em Leishmania tem uma grande dependência do controle da estabilidade e tradução dos seus mRNAs. Em eucariotos, ambos são eventos associados a proteína de ligação a cauda poli-A (PABP) e outras proteínas com domínios de ligação a RNA, as RBPs. Em Leishmania foram descritas três PABPs, sendo que a PABP1 se associa a mRNAs alvos, complexos proteicos e RBPs distintas das PABP2/3. Seu papel funcional, contudo, ainda não está claro. Esse trabalho buscou auxiliar na definição de suas funções a partir da caracterização de RBPs parceiras, as RBP23, DRBD2 e ZC3H41. Extratos citoplasmáticos de Leishmania infantum expressando cada RBP fusionada com o peptídeo HA foram utilizados em ensaios de imunoprecipitação, com seus parceiros e mRNAs alvos identificados por espectrometria de massas e sequenciamento de RNAs. Foi demonstrada a interação preferencial da RBP23 com a PABP1 e o complexo de tradução EIF4G3/EIF4E4, da DRBD2 com as PABP2/PABP3 e da ZC3H41 com as três PABPs. Ensaios de interação proteína-proteína confirmaram uma ligação direta das RBP23 e DRBD2 com as três PABPs, mapeando regiões especificas das PABPs envolvidas nessa ligação. Os mRNAs co-precipitados com a RBP23, e em menor escala a ZC3H41, codificam preferencialmente proteínas ribossomais, semelhante a PABP1 e diferentemente da DRBD2. Estes dados sugerem um novo modelo para o reconhecimento destes mRNAs pelas RBP23 e PABP1 em Leishmania. |