Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2019 |
| Autor(a) principal: |
SILVA, Renata Santana da |
| Orientador(a): |
MELO NETO, Osvaldo Pompílio de |
| Banca de defesa: |
Não Informado pela instituição |
| Tipo de documento: |
Dissertação
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal de Pernambuco
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pos Graduacao em Genetica
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: |
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| Link de acesso: |
https://repositorio.ufpe.br/handle/123456789/34172
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Resumo: |
Os tripanossomatídeos são protozoários patogênicos que se caracterizam pelo controle da sua expressão gênica ser pós-transcricional, o qual inclui eventos regulatórios durante a tradução dos mRNAs. Em geral, a tradução em eucariotos se inicia através do reconhecimento dos mRNAs por meio do complexo heterotrimérico eIF4F (eIF4A, eIF4G e eIF4E). Múltiplos homólogos dessas subunidades foram identificados em tripanossomatídeos, formando diferentes complexos do tipo eIF4F. Um desses é formado pelas proteínas EIF4E6/EIF4G5/EIF4G5-IP, porém sua função ainda não foi definida nem o modo de interação entre suas subunidades. Este trabalho buscou contribuir na caracterização destas três proteínas em células sanguíneas de Trypanosoma brucei, e mapear in vitro a interação entre as mesmas. Inicialmente verificou-se por western blot a expressão da EIF4G5 em ambas as fases do ciclo de vida do parasita. Linhagens de T. brucei expressando as proteínas EIF4G5 e EIF4G5- IP fusionadas ao tag PTP foram então obtidas e usadas em ensaios de coimunoprecipitação, técnica pela qual se pode confirmar a formação do complexo na fase sanguínea do parasita. Por fim, proteínas recombinantes foram avaliadas quanto a sua capacidade de interagir entre si em ensaios do tipo pull-down. Foram verificadas interações diretas do EIF4E6 tanto com EIF4G5 quanto EIF4G5-IP. Mutações nos aminoácidos EF91-92AA no EIF4G5 aboliu sua ligação ao EIF4E6, sugerindo ser este o sítio de interação entre essas proteínas. Esses resultados avançam no delineamento da estrutura e função do referido complexo nos tripanossomatídeos. |
