Produção e avaliação preliminar de uma proteína recombinante quimérica para uso no controle de Tristeza parasitária bovina (TPB)

• Ano de defesa: 2015
• Autor(a) principal: Gomes, Juliana da Silva
• Orientador(a): Rosinha, Grácia Maria Soares, Santos, Lenita Ramires dos, Verbisck, Newton Valério
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: Anaplasma Marginale; Babesia; Vacinas; Bovinos; Proteínas Recombinantes; Vaccines; Cattle; Recombinant Proteins
• Link de acesso: https://repositorio.ufms.br/handle/123456789/2288

A tristeza parasitária bovina é uma importante doença causada pela riquétsia Anaplasma marginale e pelos protozoários Babesia bovis e Babesia bigemina, responsáveis por consideráveis perdas econômicas ao setor agropecuário. Considerando que a vacina comercializada contra os agentes da TPB apresentam muitas desvantagens, foi proposto com este estudo obter uma proteína recombinante quimérica, contendo epítopos com potencial imunogênico, com a finalidade de testá-la posteriormente como candidata a uma nova vacina. Esta proteína recombinante quimérica foi obtida a partir de um gene sintético inserido em um vetor de expressão em organismos procarióticos, contendo porções dos genes VirB9 e VirB10 de A. marginale e P0 de Babesia sp. A proteína recombinante, denominada VIRB9VIRB10P0, foi produzida com alto grau de pureza e confirmada por avaliação em SDS PAGE e Western blotting. Estudos in silico mostraram que essa proteína mantém a antigenicidade em sua conformação recombinante. Soros de 25 bovinos naturalmente infectados com A. marginale e/ou Babesia sp. foram analisados por ELISA indireto para resposta humoral do tipo IgG. Em uma primeira análise, apenas três dos 25 soros dos animais foram capazes de reconhecer a proteína recombinante quimérica VIRB9VIRB10PO. É possível que isso tenha ocorrido porque as porções selecionadas neste estudo foram sintetizadas de modo a conter principalmente epítopos de ligação a MHC classe II, já que estudos sugerem que uma resposta imune capaz de proteger bovinos contra TPB é baseada em uma resposta predominantemente celular. Assim, estudos de resposta imune humoral com uma amostragem maior e análise de reposta celular serão avaliados pela VIRB9VIRB10P0 em imunização de camundongos.