Papel do AMPc na regulação das proteínas CREB, ERK e AKT na retina em desenvolvimento

• Ano de defesa: 2025
• Autor(a) principal: Ximenes, Lohan Gaspar Ribeiro
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Palavras-chave em Português: AMPc; EPAC; PKA; CREB; ERK; AKT; Efetores; Ativação metabólica; Regulação por estimulação
• Link de acesso: https://app.uff.br/riuff/handle/1/36584

O monofosfato cíclico de adenosina (AMPc) é um segundo mensageiro de vias de sinalização celular muito importante em processos fisiológicos do desenvolvimento do sistema nervoso central (SNC). Sua formação se dá através da ativação de receptores metabotrópicos acoplados a proteína G estimulatória ou inibitória, que aumentam ou diminuem a atividade da enzima adenil ciclase (AC), que produz AMPc a partir de adenosina trifosfato (ATP), respectivamente. Os receptores de dopamina, amplamente presentes no SNC, mais especificamente os da família D1-like, são conhecidos por promoverem acúmulo de AMPc intracelular. O AMPc promove a fosforilação de duas proteínas importantes: a proteína kinase A (PKA) e a proteína de troca ativada diretamente pelo AMPc (EPAC). A proteína de ligação ao elemento de resposta AMPc (CREB) é uma proteína nuclear que atua como um fator de transcrição celular que se liga ao elemento de resposta ao AMPc (CRE), é regulada por diversas cascatas de sinalização celular e exerce papel na proliferação celular, diferenciação, sobrevivência, neurogênese e na plasticidade neuronal. A proteína kinase regulada por sinal extracelular (ERK) atua no crescimento e diferenciação celular, na sobrevivência, no apoptose e em outros processos celulares. Quando a ERK é fosforilada, pode migrar para o núcleo e ativar fatores de transcrição ou ativar a RSK que geralmente está presente no citoplasma, que por sua vez fosforila a CREB na Ser133 no núcleo. A proteína kinase B (PKB) ou AKT é uma serina/treonina kinase conhecida por atuar na síntese de proteínas, proliferação, diferenciação e sobrevivência celular. O objetivo principal desse trabalho é avaliar a via de sinalização induzida pelos receptores de dopamina (DA) e por forskolina (FSK) (ativador da adenil ciclase) na regulação da CREB, ERK e AKT descrevendo os papeis distintos da PKA e da EPAC. Os resultados em retinas ex vivo nas idades de 10 e 16 dias mostraram que a DA ou a FSK aumentam a fosforilação da CREB na Ser133 e da ERK e a desfosforilação da AKT na Ser473 de maneira dose e tempo dependente. O efeito de fosforilação na CREB não é bloqueado com a pré-incubação de KT5720, ESI-05 ou ESI-09 individualmente, porém a pré-incubação conjunta com ESI-05 + ESI-09 bloqueia a fosforilação da CREB. A fosforilação da ERK é bloqueada com o ESI-05 ou o ESI-09. A desfosforilação da AKT Ser473 não é bloqueada com o KT5720, (ESI-05 ou ESI-09), ou os dois inibidores juntos ESI-05 e ESI-09. Também foi utilizado outros inibidores para tentar inibir a fosforilação da CREB e ERK. A desfosforilação da AKT Ser473 não foi bloqueada por nenhum dos inibidores utilizados. O presente estudo indica que CREB, ERK e AKT são reguladas durante o desenvolvimento da retina em diferentes idades.