Detalhes bibliográficos
| Ano de defesa: |
2020 |
| Autor(a) principal: |
Gondim, Mariana Marrega Rezende
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| Orientador(a): |
Silva, Aristeu Vieira da |
| Banca de defesa: |
Vieira, Aristeu Vieira da,
Pinho, Flaviane Alves de,
Góis, Marcelo Biondaro,
Franke, Carlos Roberto,
Perinotto, Wendell Marcelo de Souza |
| Tipo de documento: |
Tese
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| Tipo de acesso: |
Acesso aberto |
| Idioma: |
por |
| Instituição de defesa: |
Universidade Federal da Bahia
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| Programa de Pós-Graduação: |
Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal nos Trópicos (PPGCAT)
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| Departamento: |
Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia
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| País: |
Brasil
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| Palavras-chave em Português: |
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| Área do conhecimento CNPq: |
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| Link de acesso: |
https://repositorio.ufba.br/handle/ri/41145
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Resumo: |
Toxoplasma gondii é um parasito intracelular obrigatório que infecta aproximadamente um terço da população mundial. A infecção horizontal do parasito ocorre, principalmente, pela ingestão de cistos teciduais contendo bradizoítos e/ou ingestão de oocistos esporulados. Assim, objetivou-se com o trabalho corrente, elaborar um protocolo de separação imunomagnética (SI) de cistos e esporocistos de T. gondii, e isolar a proteína reconhecida pelo anticorpo monoclonal (AcMo) K8/15-15. Esse foi o primeiro AcMo descrito capaz de reconhecer simultaneamente proteínas de cistos e esporocistos do parasito. Mais de 2.000 cistos produzidos in vitro foram isolados após a SI do conteúdo de um frasco de cultura de 25 cm 2 , além de um aumento em até seis vezes da relação cisto/célula hospedeira após SI. Cistos produzidos in vivo foram separados com êxito, sem contaminação ou debris de tecido murino. Esporocistos também foram isolados por SI, mostrando, assim, que o método de pode ser empregado para estudos proteômicos envolvendo paredes de cisto tecidual e esporocisto de T. gondii. Por meio da técnica de SI foi possível concentrar uma grande quantidade de cistos e, após imunoprecipitação, isolar o antígeno alvo marcado pelo AcMo K8/15-15. O antígeno foi separado por eletroforese em gel de poliacrilamida com dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) e apresentou bandas de 272 e 381 kDa, identificadas por imunoblot e visualizadas em SDS PAGE corado com azul de Comassie. Os resultados aqui obtidos possibilitarão, em experimentos futuros, a completa caracterização da proteína alvo do AcMo K8/15-15, empregando-se, especialmente, sequenciamento por espectrometria de massas da proteína alvo. A proteína purificada pode ser testada em estudos envolvendo diagnóstico sorológico, assim como, para a produção de vacinas contra toxoplasmose. |
