Análise do perfil genético de marcadores de resistência a antimaláricos em isolados de campo de p. falciparum e p. vivax de 12 localidades malarígenas do estado do Amazonas.

• Ano de defesa: 2013
• Autor(a) principal: Ferreira, Cynthia de Oliveira
• Outros Autores: http://lattes.cnpq.br/3973586912917813
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Federal do Amazonas; Instituto de Ciências Biológicas; BR; UFAM; Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia
• Palavras-chave em Português: Plasmodium; Amazônia; Pfcrt; Pfatp6; Pvmdr; Resistência; CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
• Link de acesso: http://tede.ufam.edu.br/handle/tede/2253

Na Amazônia legal, o estado do Amazonas registrou 180.290 casos de malária no ano de 2006, fato que acarreta em grande impacto econômico e social para a região. O diagnóstico é tradicionalmente realizado pela técnica da gota espessa (G.E.), no entanto fatores como a redução de sensibilidade em baixas parasitemias e dificuldade no diagnóstico de infecções mistas justificam a adoção de metodologias com maior sensibilidade e especificidade. Através da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) esses objetivos podem ser alcançados, no entanto, o elevado custo ainda é um fator que impede sua utilização como rotina nas diferentes regiões endêmicas. Alternativamente, para monitoramento da resposta terapêutica, identificação de infecções mistas e estudos de genotipagem, esta técnica já é implementada. Este trabalho teve por objetivo a caracterização molecular de isolados de Plasmodium falciparum e P. vivax de 12 localidades endêmicas do estado do Amazonas: Manaus, Careiro, Borba, Autazes, Itacoatira, Presidente Figueiredo, Barcelos, São Gabriel da Cachoeira, Coari, Tefé, Guajará e Humaitá. As amostras foram obtidas segundo diagnóstico da G.E. no entanto foi feito o estudo de infecções mistas, não detectadas, através de PCR, e adicionalmente foi padronizada metodologia em tempo real para agilizar e dar maior confiabilidade aos diagnósticos de amostras utilizadas em estudos desenvolvidos pela gerência de malária da Fundação de Medicina Tropical do Amazonas (FMTAM). Os genes utilizados para caracterização do P. falciparum foram o pfcrt e pfatp6, e para o estudo de P. vivax utilizou-se o gene pvmdr. Como metodologia adotou-se o sequenciamento automático e a genotipagem utilizando sondas em sistema de PCR em Tempo Real. Todas as amostras de P. falciparum analisadas para o gene pfcrt demonstraram perfil genético semelhante à cepa 7G8, que contem a mutação K76T, comprovando o fenótipo resistente observado em estudos anteriores. Para o gene pfatp6 foram descritos 3 haplótipos distintos, com mutações identificadas nas posições 1204, 1888 e 2694. A análise do gene mdr de P. vivax identificou mutações nos códons 976 e 1076 em 11 amostras de um total de 100 analisadas, distribuídas entre os munícipios de Autazes, Coari, Manaus e Tefé. A identificação do perfil genético de populações de Plasmodium circulantes na Amazônia é uma importante ferramenta para o entendimento da dinâmica de transmissão da malária e para o constante monitoramento das ações de controle da doença