Avaliação da eficácia e segurança de produtos naturais e sintéticos ativos sobre o Trypanosoma cruzi
| Ano de defesa: | 2022 |
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| Autor(a) principal: | |
| Orientador(a): | |
| Banca de defesa: | |
| Tipo de documento: | Dissertação |
| Tipo de acesso: | Acesso aberto |
| Idioma: | por |
| Instituição de defesa: |
Universidade do Estado do Rio de Janeiro
Centro Biomédico::Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes Brasil UERJ Programa de Pós-Graduação em Biociências |
| Programa de Pós-Graduação: |
Não Informado pela instituição
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| Departamento: |
Não Informado pela instituição
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| País: |
Não Informado pela instituição
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| Palavras-chave em Português: | |
| Link de acesso: | http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/20343 |
Resumo: | Mais de 110 anos após a descoberta da Doença de Chagas (DC), apenas dois derivados nitro-heterocíclicos, associados a eficácia parcial e efeitos adversos, estão disponíveis para o tratamento de cerca de 7 milhões de infectados, sobretudo na América Latina. Considerando a importância da bioprospecção e do desenvolvimento racional de fármacos na busca por novas alternativas terapêuticas mais seletivas, este trabalho investigou, através de métodos in silico e in vitro, a eficácia e segurança de produtos naturais e de síntese com potencial aplicação no controle da infeção parasitária por Trypanosoma cruzi. Os produtos naturais consistiram em um extrato hidrometanólico das folhas de Plinia cauliflora (HME), conhecida como jabuticabeira, e seus constituintes fenólicos mais abundantes, e os sintéticos, foram dois novos derivados 3-nitro-1,2,4-triazólicos, PCBN 009/17 e PCBN 012/17. A caracterização metabolômica do extrato foi realizada por cromatografia líquida de ultra-eficiência acoplada a espectrometria de massas. Análises in silico preliminares de propriedades farmacocinéticas e de toxicidade (ADMET) foram conduzidas nas plataformas LAZAR, pkCSM e SwissADME. Posteriormente, a mutagenicidade e genotoxicidade foi investigada pelo Teste de Ames e ensaio do micronúcleo, em paralelo a determinação de citotoxicidade em células hepáticas HepG2 e F C3H pelos ensaios WST-1 e LDH. A atividade tripanocida in vitro foi avaliada sobre formas tripomastigotas da cepa Y de T. cruzi. Um total de 14 compostos fenólicos foram identificados em HME, majoritariamente flavonoides. As predições in silico para os compostos mais abundantes, (+)- catequina, ácido digálico e hesperidina, indicam um perfil de druglikeness moderadamente viável e de baixa toxicidade. Nos ensaios in vitro, HME não produziu mutações pontuais no modelo procarioto, nem aumento da frequência de micronúcleos. Contudo, exibiu efeitos citostáticos, reduzindo índices de divisão nuclear de HepG2. Complementarmente, HME apresentou citotoxicidade tempo e dose-dependente em ambas as linhagens, promovendo morte celular através de danos à membrana celular e mais evidentemente por disfunção mitocondrial, sendo F C3H, a linhagem mais sensível. Em baixas concentrações, HME inibiu tripomastigotas sanguíneos, gerando respostas dose-dependentes após 2 e 24 horas de exposição. Em continuidade, as análises in silico dos derivados nitrotriazólicos, indicaram alertas estruturais de toxicidade para ambas as moléculas, que foram preditas como hepatotóxicas e como substratos das enzimas CYP450 relacionadas às interações medicamentosas. Além disso, os derivados foram preditos como mutagênicos, em concordância com resultados in vitro, em que induziram mutações por substituição de pares de bases e deslocamento do quadro de leitura. Entretanto, a mutagenicidade e função da ativação metabólica foram influenciadas pelo tipo de substituinte, de forma que o PCBN 012/17 foi mutagênico apenas na maior concentração avaliada. Os derivados induziram principalmente citotoxicidade associada a danos à membrana celular, em concentrações superiores às suas concentrações tripanocidas descritas anteriormente. Em síntese, apesar das evidências pontuais de toxicidade, os produtos naturais e de síntese avaliados no presente estudo, especialmente PCBN 012/17, podem ser empregados no desenvolvimento de alternativas terapêuticas mais acessíveis e seletivas para DC |