Prevalência de genes do Sistema de Secreção do Tipo III e citotoxicidade de isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa oriundos de UTI, coinfectados ou não com SARS-CoV-2

• Ano de defesa: 2023
• Autor(a) principal: Longuinho, Pamella Constantino Teles
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Faculdade de Ciências Médicas; Brasil; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Microbiologia
• Palavras-chave em Português: P. aeruginosa; Genes do SST3; Coinfecção; Pseudomonas aeruginosa; Sistemas de secreção bacterianos; SARS-CoV-2; T3SS genes; Coinfection; CIENCIAS BIOLOGICAS::MICROBIOLOGIA::MICROBIOLOGIA APLICADA::MICROBIOLOGIA MEDICA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/22709

Pseudomonas aeruginosa é um patógeno oportunista frequentemente encontrado nos hospitais e capaz de causar tanto infecções crônicas quanto agudas. No ambiente hospitalar um dos principais microrganismos causadores de Infecções Rrelacionadas à Assistência à Saúde. O perfil patogênico de P. aeruginosa está associado aos diversos fatores de virulência expressos, sendo o sistema de secreção do tipo 3 e suas proteínas efetoras, Exos, ExoU, ExoY, e ExoT, um dos mais estudados. As proteínas ExoU e ExoS estão relacionadas a uma maior virulência de isolados clínicos, sendo o genótipo exoS+/exoU- associado a infecções crônicas, enquanto que o genótipo exoS-/exoU+ está relacionado a processos infecciosos agudos. A infecção das vias aéreas inferiores por P. aeruginosa é uma importante causa de morbidade e mortalidade entre indivíduos hospitalizados e portadores de doenças respiratórias crônicas, parte devido à ação das proteínas do sistema de secreção do tipo 3. Esses indivíduos ficam mais suscetíveis à infecção simultânea com vírus que atingem as vias aéreas, como foi visto recentemente com o SARS-CoV-2, e mais propensos a internações em UTI. Este trabalho teve como objetivo verificar a presença de genes do SST3 e determinar o potencial citotóxico de isolados clínicos de P. aeruginosa originários de pacientes de UTI coinfectados ou não com SARS-CoV-2. Para isto, foi feita extração de DNA e PCR de 84 isolados de P. aeruginosa, coinfectados ou não com SARS-CoV-2, tendo como alvo as 4 proteínas efetores do sistema de secreção do tipo 3. Para determinar o potencial citotóxico foi feita a pesquisa da viabilidade de células epiteliais respiratórias da linhagem A549 infectadas com os diferentes isolados. Quando analisamos a prevalência de genes que codificam fatores de virulência do SST3, vemos que ExoT foi o fator de virulência mais prevalente nos isolados, sendo encontrado em 97,61% dos isolados clínicos de P. aeruginosa não infectados com SARS- CoV-2, e em 92,85% dos isolados de P. aeruginosa coinfectados com SARS-CoV-2. ExoY foi o segundo fator de virulência do SST3 mais prevalente, totalizando 80,95% das cepas, e 71,42% dos isolados clínicos de P. aeruginosa obtidos de pacientes sem e com coinfectados com SARS-CoV-2, respectivamente. As toxinas ExoS e ExoU divergiram quando comparados os 2 grupos de pacientes, uma vez que nos isolados clínicos de P. aeruginosa obtidos de pacientes coinfectados com SARS-CoV-2, exoS foi mais prevalente, presente em 50% das cepas, enquanto que exoU foi detectada em 40,47% das cepas. Os isolados obtidos de pacientes sem coinfecção, observamos proporções iguais (50% cada) de presença de exoS e exoU. Quanto à citotoxicidade dos isolados, nenhum espécime do grupo com coinfecção apresentou alta citotoxicidade. No grupo com coinfecção, as cepas clínicas 24, 25 e 26 além de apresentarem alta citotoxicidade, também foram exoU+. Nossos dados mostram que os isolados clínicos simultaneamente infectados com SARS-CoV-2 foram menos diversificados em relação aos grupos de genótipos achados, e menos citotóxico para células de mamíferos quando comparados com espécimes de P. aeruginosa sem coinfecção.