Investigação da infertilidade masculina

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Souza, Paula Fontoura Coelho de
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes; BR; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Biologia Humana e Experimental
• Palavras-chave em Português: Spermatozoa; Leptin; Liraglutide; Oxidative stress; Fertility; Espermatozoides; Leptina; Liraglutida; Estresse oxidativo; Fertilidade; Stress oxidativo; Fecundidade; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MORFOLOGIA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/7797

A leptina e seu receptor estão presentes nos espermatozoides, no entanto, seu papel sobre a função espermática ainda é controverso. Trabalhos recentes mostram que a leptina diminui o estresse oxidativo, que é considerado uma causa de infertilidade e tem efeitos deletérios sobre a fragmentação do DNA (fDNA) espermático e a sobrevida dos espermatozoides após o descongelamento. Assim como a leptina, a literatura tem apontado o hormônio peptídeo similar ao glucagon (GLP-1) como um potencial regulador da função reprodutiva. Este hormônio tem sido utilizado para o tratamento de diabetes tipo 2, porém, devido à sua curta meia vida, foram criados agonistas do receptor do GLP-1 com maior meia vida, como é o caso da liraglutida. O presente estudo relatou um caso de azoospermia relacionado ao uso do liraglutida, dessa forma, se fez necessário aprofundar a avaliação de seus efeitos sobre o sistema reprodutor masculino. O objetivo deste estudo foi investigar a função dos hormônios leptina e liraglutida sobre a função espermática. Participaram deste estudo 114 indivíduos normospérmicos provenientes de laboratório especializado em reprodução assistida. Para a avaliação do efeito da leptina, as amostras de espermatozoides sofreram congelamento e descongelamento, com e sem capacitação, seguida por incubação em meio acrecido ou não com leptina. Antes e após o congelamento, foi realizada fDNA através da técnica de Sperm Chromatin Dispersion. Os parâmetros de estresse oxidativo foram mensurados através de espectrofotometria. O caso do paciente azoospérmico com uso do liraglutida foi publicado em forma de relato de caso e para entender o processo pelo qual a liraglutida pode ter afetado a espermatogênese, se fez necessário avaliar a presença do receptor do GLP-1 nos espermatozoides humanos e testículos de camundongos através da técnica de Western Blotting, pois este dado ainda não foi descrito na literatura. Foi realizada ainda a incubação in vitro de espermatozoides com liraglutida e analisado seu efeito na função espermática através da análise das taxas de motilidade e vitalidade. Para análise estatística dos resultados, foi utilizado o teste t pareado para comparar os grupos antes e após o congelamento, também foi utilizado o teste ANOVA de medidas repetidas, seguida pelo pós teste de Holm-Sidak para comparar os grupos antes e após incubação dos espermatozoides com diferentes concentrações de leptina e de liraglutida. Considerou-se estatisticamente significante quando p≤0,05. Foi observado um aumento significativo da fDNA espermático após o descongelamento, comparado às amostras a fresco. A adição de leptina às amostras capacitadas antes do congelamento reduziu as taxas de fDNA e aumentou a atividade de enzimas antioxidantes. Detectamos a expressão protéica do receptor do GLP-1 em espermatozoides humanos e em testículos de camundongos e a liraglutida reduziu a taxa de motilidade espermática. A leptina e liraglutida estão envolvidas na regulação espermática. A adição de leptina às amostras capacitadas reduziu a fDNA e o estresse oxidativo melhorando a qualidade espermática no pós-descongelamento. Verificamos que tanto os espermatozoides humanos, quanto os testículos de camundongos, expressam o receptor do GLP-1. A incubação in vitro dos espermatozóides com liraglutida reduziu a taxa de motilidade progressiva, e o relato de caso sugere que a liraglutida causou uma interrupção da espermatogênese, sendo restabelecida com a suspensão do medicamento.