Estudo do músculo esquelético de camundongos C57BL/6 com síndrome metabólica

• Ano de defesa: 2010
• Autor(a) principal: Carvalho, Manoela Lopes
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes; BR; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Biologia Humana e Experimental
• Palavras-chave em Português: Muscle; Skeletal; Metabolic syndrome; Diet; High-fat; Músculo esquelético; Síndrome metabólica; Dieta hiperlipídica; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::MORFOLOGIA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/7877

A síndrome metabólica é um conjunto de fatores de risco cardiometabólicos que incluem a obesidade, a resistência à insulina, a hipertensão e a dislipidemia. Em camundongos C57BL/6 a dieta hiperlipídica causa um aumento no ganho de massa corporal e potencialmente aumenta outros fatores de risco associados com a síndrome metabólica. O acúmulo de lipídeos em células não adiposas pode causar uma disfunção celular ou morte celular via apoptose, este processo é geralmente definido como lipotoxicidade . Com o objetivo de examinar os possíveis efeitos de uma dieta hiperlipídica na morfologia do músculo esquelético, vinte camundongos C57BL/6 machos, com treze semanas de idade foram separados em dois grupos e foram alimentados durante três meses com: a) uma dieta hiperlipídica (grupo HF, 60% das calorias provenientes de lipídeos) ou b) dieta padrão para roedores (grupo SC, 10% das calorias provenientes de lipídeos). Os camundongos foram sacrificados e o sangue foi coletado para análise bioquímica. Os resultados mostraram que não houve diferença significativa entre os grupos experimentais nos níveis plasmáticos de glicose, porém os níveis plasmáticos de insulina, colesterol e triglicerídeos estavam aumentados no grupo HF e, além disso, esses animais apresentaram um maior índice de resistência à insulina e aumento na massa corporal. Para estudo ultraestrutural de rotina, o músculo gastrocnêmico foi dissecado, as amostras foram fixadas em glutaraldeído 2,5% e os cortes ultrafinos foram observados no microscópio eletrônico de transmissão (MET). Para detecção de inclusões lipídicas através de citoquimica ultraestrutural, os fragmentos de músculo esquelético foram fixados em GA 2,5% e processados utilizando a técnica do tampão Imidazol. Para a posterior quantificação dessas inclusões por estereologia foram selecionados aleatoriamente três blocos de Epon de cada animal, os cortes ultrafinos foram observadas MET e as eletromicrografias aleatórias foram examinadas para a realização da quantificação. O aumento do acúmulo intramiocelular de lipídeos foi observado no grupo HF quando comparado com o grupo SC (P<0.0001) e as mitocôndrias apresentaram-se com alterações morfológicas. Para detecção de Ca2+ ATPase de retículo sarcoplasmático (SERCA1), fragmentos de músculo esquelético de ambos os grupos experimentais foram congelados em nitrogênio líquido e os cortes obtidos em criostato foram imunomarcados com anticorpo anti-SERCA1, seguido da incubação com o anticorpo secundário conjugado com Alexa 488. Posteriormente, esses cortes foram observados em microscópio confocal e os resultados mostraram um aumento da expressão de Ca2+ ATPase de retículo sarcoplasmático (SERCA1) no grupo HF. Portanto, nós demonstramos que uma dieta HF promove o desenvolvimento de um conjunto de desordens metabólicas, caracterizando o típico modelo de síndrome metabólica, e, além disso, modifica a ultraestrutura das fibras musculares esqueléticas, aumentando o número de inclusões lipídicas, alterando a morfologia mitocondrial e aumentando a expressão de Ca2+ ATPase de retículo sarcoplasmático.