Cultura de tecidos e monitoramento da estabilidade genética e metabólica de plantas de Petiveria alliacea L. produzidas e conservadas in vitro

• Ano de defesa: 2016
• Autor(a) principal: Soares, Bianka de Oliveira
• Tipo de documento: Tese
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade do Estado do Rio de Janeiro; Centro Biomédico::Instituto de Biologia Roberto Alcantara Gomes; BR; UERJ; Programa de Pós-Graduação em Biologia Vegetal
• Palavras-chave em Português: Guinea; In vitro morphogenesis; Somatic embryogenesis; Phytochemical analysis; Somaclonal variation; Chromatographic analysis; RAPD; Guiné; Morfogênese in vitro; Embriogênese somática; Análise fitoquímica; Variação Somaclonal; Análises cromatográficas; Plantas medicinais; Petiveria alliaceae - Propagação-in-vitro; Análise cromatográfica; CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BOTANICA
• Link de acesso: http://www.bdtd.uerj.br/handle/1/7905

A cultura de tecidos vegetais é uma ferramenta importante para a produção e/ou conservação de germoplasma e metabólitos. Este trabalho teve como objetivos estabelecer sistemas de cultura de tecidos e criopreservação de Petiveria alliacea, espécie com importantes propriedades medicinais, muito utilizada na medicina popular e rituais afro-brasileiros. Foram estudadas populações de plantas de cinco regiões do estado do Rio de Janeiro. Visando ao controle do material produzido e conservado in vitro , foram estabelecidas metodologias de monitoramento da variabilidade genética, por meio de marcadores moleculares, fitoquímicos e dos efeitos genotóxicos e/ou antigenotóxicos dos extratos. Dentre os diferentes métodos aplicados para a produção de clones, (i) a multiplicação a partir de ápices caulinares em resposta a diferentes citocininas, em diferentes concentrações, forneceu cerca de 4-5 plantas por explante dependendo da população e do tipo de citocinina utilizada; (ii) embriões somáticos foram induzidos com diferentes fitorreguladores, direta e indiretamente, a partir de folhas e raízes de plantas in vitro , apresentando alto potencial de multiplicação e de conversão a plantas; (iii) culturas de raízes adventícias foram obtidas em resposta à diferentes concentrações de auxinas (AIA, ANA, AIB, 2,4D), sendo que raízes longas e individualizadas foram obtidas apenas na presença de AIB a 1,02 μM, ocorrendo a formação de novelos e embriões somáticos nos demais tipos e concentrações de auxinas utilizadas. O monitoramento fitoquímico, através de métodos cromatográficos, e o monitoramento molecular, através de RAPD, foram aplicados em materiais vegetais mantidos em campo e obtidos e conservados in vitro. Diferentes polissulfetos foram observados na análise por CLAE, em todos os materiais avaliados, constituindo-se bons marcadores biossintéticos para monitorar o material produzido e conservado in vitro. Na análise RAPD, foram determinados iniciadores capazes de identificar variedades genéticas entre as populações estudadas, além disso foram determinados nove iniciadores capazes de identificar polimorfismos entre os clones. A investigação dos efeitos tóxicos dos extratos aquosos no DNA plasmidial mostrou que estes foram capazes de induzir alterações na conformação estrutural do DNA, indicando a ocorrência de quebras, dependentes da concentração. Além disso, foi observado um efeito protetor contra os danos oxidativos causados pelo cloreto estanoso, indicando também, um potencial antigenotóxico. Assim, o monitoramento genético, fitoquímico e biológico, realizado neste trabalho permitiu a caracterização e controle do germoplasma de P. alliacea produzido e conservado in vitro