Identificação de uma nova fitase bacteriana através de prospecção metagenômica

• Ano de defesa: 2018
• Autor(a) principal: Farias, Nathálya Carvalho
• Tipo de documento: Dissertação
• Tipo de acesso: Acesso aberto
• Idioma: por
• Instituição de defesa: Universidade Estadual da Paraíba; Pró-Reitoria de Pós-Graduação e Pesquisa - PRPGP; Brasil; UEPB; Programa de Pós-Graduação em Ciências Agrárias - PPGCA
• Palavras-chave em Português: Oryza sativa L.; Restos culturais; Metagenômica funcional; Functional metagenomics; Cultural remains; CIENCIAS AGRARIAS
• Link de acesso: http://tede.bc.uepb.edu.br/jspui/handle/tede/3188

A diversidade bacteriana de amostras ambientais e seu potencial ainda são pouco explorados. As abordagens metagenômicas oferecem a oportunidade para a prospecção de genes de interesse biotecnológico a partir de microrganismos não-cultiváveis em laboratório. Materiais em processo de compostagem exibem grande atividade microbiológica, o que torna o ambiente propício para a degradação de material lignocelulósico. Neste contexto, diversas enzimas vêm sendo identificadas por catalisarem estas reações. As fitases são enzimas fosfatases amplamente produzidas que hidrolisam o fitato liberando fósforo e minerais quelados. Devido a este potencial, estas enzimas têm se tornado facilmente interessantes para o campo biotecnológico. Procurou-se assim, investigar o potencial metagenômico para a identificação de genes com atividade fitásica. Após a obtenção do material, foi realizada a extração de DNA, seguida da etapa de purificação. Usou-se o DNA total extraído para construção de biblioteca metagenômica em vetor cosmídeo, através de kits comerciais (EPICENTRE). Os clones positivos para atividade fitásica foram sequenciados e analisados. A prospecção realizada neste estudo, identificou um gene (PhyRC001) que codifica uma fitase, onde, a identidade de aminoácidos entre PhyRC001 e os seus homólogos mais próximos publicados são inferiores a 60%.